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植物硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NOT）ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法：

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請(qǐng)1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)。

（植物處理方案）

1、 新鮮植物組織請(qǐng)?jiān)谝旱谐浞盅心?，如無(wú)液氮，剪碎，玻璃勻漿器研磨也可；

2、 加入樣品體積9倍（鮮重：勻漿液體積）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 請(qǐng)于4℃ ，3000rpm，離心10min，收集上清；

4、 取上清檢測(cè)。

注：標(biāo)本均應(yīng)密封保存，短期內(nèi)使用（1周左右），可4度保存；若樣本收集與實(shí)驗(yàn)時(shí)間相隔較長(zhǎng)，務(wù)必保存在-20或-80度，盡量不要超過(guò)半年，同時(shí)避免反復(fù)凍融。

植物硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NOT）ELISA檢測(cè)試劑盒組成及其配置：

1. 96孔酶聯(lián)板(Assay plate ):可檢測(cè)90個(gè)樣

2. 20x濃縮洗滌液(20X WashSolution): 25ml

3. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):0.3ml*6管

4. 稀釋液(Sample Diluent): 6ml

5. 終止液(Stop Solution): 6ml

6. 底物溶液A、B（Chromogen Solution）:6ml*

7. 檢測(cè)抗體-HRP（HRP-Conjugate reagent）:10ml

8.說(shuō)明書（User manual）

9.封板膜（Closure plate membrane）

10.自封袋（Sealed bags）

ELISA試劑盒的使用過(guò)程中常見的問(wèn)題有很多。如：加樣器不正 確、保溫設(shè)備不良、洗滌用水不規(guī)范等等對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響極大。我司為您準(zhǔn)備了以下解決問(wèn)題的方法：

1）嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果，所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃，使用后立即冷藏保存試劑。

2）洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果，在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體，溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥。

3）消除底板殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4）底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5）避免試劑盒標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6）任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體，避免影響試劑中的生物活性。

7）平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。