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科研和臨床檢驗(yàn)場所PCR分子實(shí)驗(yàn)使用頻率較高，PCR實(shí)驗(yàn)怕出問題了，當(dāng)PCR出現(xiàn)假陽性的時(shí)候，我們常常會(huì)考慮是不是引物、試劑、Mix、模板、水等發(fā)生了污染，然后逐一排查，有時(shí)還是找不到原因，耗時(shí)耗力。

 

 

這些試劑和儀器到底為什么會(huì)被污染了呢？

 

其實(shí)是核酸氣溶膠污染。PCR技術(shù)的高擴(kuò)增效率產(chǎn)生的核酸氣溶膠污染，會(huì)導(dǎo)致檢測結(jié)果的假陽性。樣本和擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)常出現(xiàn)多批次相同的情況，核酸氣溶膠污染在實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)不斷累積，日積月累從而導(dǎo)致污染風(fēng)險(xiǎn)不斷增加，假陽性的發(fā)生頻率也越來越高。

 

氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點(diǎn)分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系，在氣體與液體面摩擦?xí)r，比如在操作時(shí)比較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管，離心機(jī)離心，擴(kuò)增后PCR產(chǎn)物開蓋時(shí)、吸樣時(shí)及移液器槍反復(fù)吹吸樣品都可形成氣溶膠而污染。

 

核酸氣溶膠與PCR過程相伴相生，污染來的悄無聲息，防不勝防，假陽性結(jié)果讓無數(shù)生物學(xué)子奔潰與抓狂，那我們究竟該如何應(yīng)對？

 

 

本圖文解析如下PCR實(shí)驗(yàn)室污染控制策略以供參考！！