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        1. 上海篤瑪生物科技有限公司
          中級(jí)會(huì)員 | 第2年

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          人轉(zhuǎn)移因子(TF) ELISA 試劑盒

          參  考  價(jià):1560 - 2600
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號(hào)

          • 品牌

            DUMABIO/篤瑪生物

          • 廠商性質(zhì)

            經(jīng)銷商

          • 所在地

            上海市

          規(guī)格

          96T 2600元 100盒可售

          48T 1560元 100盒可售

          更新時(shí)間:2024-09-08 20:58:49瀏覽次數(shù):261次

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          供貨周期 現(xiàn)貨
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          人轉(zhuǎn)移因子(TF) ELISA 試劑盒


          人轉(zhuǎn)移因子(TF) ELISA 試劑盒 


          實(shí)驗(yàn)原理

          本試劑盒基于檢測樣本的特異性抗體包被酶標(biāo)板,加入待測樣本,樣本與包被在酶標(biāo)板上的特異性抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。清洗后加入酶標(biāo)二抗,與免疫復(fù)合物結(jié)合,形成完整的三明治復(fù)合物。再加入底物溶液,底物在酶的作用下變色,顏色的深淺與樣本的濃度呈正相關(guān)。最后加入終止液,使反應(yīng)停止,在450nm波長下測量各孔的光密度值(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本的濃度。

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          實(shí)驗(yàn)步驟

          1. 樣品收集與處理

          (1)根據(jù)需要收集不同種類的樣品,如血清、血漿、尿液等。

          (2)對于血清和血漿樣品,將采集的血液靜置一段時(shí)間后,離心分離出血清或血漿。

          (3)對于尿液樣品,收集尿液后,可直接進(jìn)行檢測。

          2. 樣品稀釋

          根據(jù)試劑盒說明,對需要稀釋的樣品進(jìn)行適當(dāng)比例的稀釋。

          3. 加樣

          (1)按照試劑盒說明,分別將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和待測樣品加入相應(yīng)的孔中。

          (2)每孔加入50μL,輕輕震蕩混勻。

          4. 封閉

          根據(jù)試劑盒說明,加入適量的封閉液,覆蓋板孔,并輕輕震蕩混勻。封閉液一般為含有一定濃度的非特異性結(jié)合配體的溶液,可以降低非特異性結(jié)合的影響。

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          5. 洗滌

          (1)將板孔洗滌液加入到每個(gè)孔中,輕輕震蕩,然后倒掉洗滌液。重復(fù)洗滌3次,每次用洗滌液充分洗滌

          (2)最后一次洗滌后,用紙巾輕輕吸干板孔表面的水分。

          6. 酶標(biāo)二抗加入及孵育

          (1)根據(jù)試劑盒說明,將酶標(biāo)二抗加入相應(yīng)的孔中。

          (2)孵育一定時(shí)間后,將板孔中的溶液倒掉。

          7. 洗滌與顯色

          (1)重復(fù)步驟5的洗滌過程。

          (2)加入顯色劑,孵育一定時(shí)間后,將板孔中的溶液倒掉。

          8. 終止反應(yīng)與讀數(shù)

          (1)加入終止液,終止酶促反應(yīng)。

          (2)用酶標(biāo)儀在450nm波長處讀取各孔的光密度值(OD值)。


          人轉(zhuǎn)移因子(TF) ELISA 試劑盒 


          實(shí)準(zhǔn)驗(yàn)備

                  在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,最好-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

          液體類標(biāo)本:  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

          1. 血清:

          室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

          2. 血漿:

          應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

          3. 尿液:

          用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

          4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:

          檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

          5. 培養(yǎng)細(xì)胞

              檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

          6. 組織標(biāo)本

              切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

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          結(jié)果

           繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,

          按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

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          免責(zé)聲明

          試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。

          嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。


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