猴髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒       

本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，通過間接法檢測樣本中的白蛋白。將抗原包被在固相載體上，然后加入樣本和特異性抗體，抗原抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的成分后，加入酶標(biāo)記的二抗，與免疫復(fù)合物中的抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物。最后加入底物顯色，顏色深淺與樣本中白蛋白的含量呈正相關(guān)。

準(zhǔn)備工作

1.孔板室溫平衡1小時

2.做好布板圖譜

3.樣本解凍

4.準(zhǔn)備各型號的移液槍、槍頭、量筒

5.準(zhǔn)備雙蒸水

6.根據(jù)樣本量配好樣本xi釋液

7.根據(jù)樣本量及洗板次數(shù)配好洗液

8.若需要提前設(shè)置好振板器、洗板器

9.準(zhǔn)備足夠量的擦手紙

10.根據(jù)說明書提示，溶解標(biāo)準(zhǔn)品

11.配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品

12.配制質(zhì)控品

13.根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋樣本

14.準(zhǔn)備好封板膜

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 準(zhǔn)備：準(zhǔn)備好所有試劑、材料和器具。

2. 溫育：將包被有特異性抗體的酶標(biāo)板放入37℃溫箱中溫育30分鐘。

3. 加樣：分別向各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本，輕輕混勻。

4. 溫育：將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育30分鐘。

5. 洗滌：清洗酶標(biāo)板，除去未結(jié)合的抗原抗體。

6. 加酶標(biāo)二抗：向各孔中加入酶標(biāo)二抗，輕輕混勻。

7. 溫育：將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育30分鐘。

8. 洗滌：清洗酶標(biāo)板，除去未結(jié)合的酶標(biāo)二抗。

9. 加底物溶液：向各孔中加入底物溶液，輕輕混勻。

10. 顯色：將酶標(biāo)板放入37℃溫箱中繼續(xù)溫育15分鐘。

11. 終止：向各孔中加入終止液，混勻。

12. 測量：在450nm波長下測量各孔的光密度值（OD值）。

 猴髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒  

注意事項(xiàng)

A 仔細(xì)閱讀說明書。

B 檢查試劑盒標(biāo)簽上的有效期。如果超過有效期，請勿使用。

C 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）。

D 標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。

E 準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，（比如移液器，試管，清洗器，酶標(biāo)儀）。

F 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量。

G 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件，保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲。

H 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液（比如沉淀或變色）。有些試劑，比如標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液或者檢測稀釋液，可能在設(shè)計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標(biāo)板之前，必需充分混勻。而由于沉淀物的特性，在加入酶標(biāo)板之前，必需不停攪拌。

I 保證充分的孵育時間和溫度。

J 切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。

K 在混合或溶解蛋白溶液時，避免泡沫產(chǎn)生。

L 在實(shí)驗(yàn)開始之前，安排好實(shí)驗(yàn)流程。

M 在實(shí)驗(yàn)開始之前，清潔工作臺。

N 若有問題，應(yīng)與我公司或代理商的技術(shù)支持聯(lián)系

結(jié)果判斷

1. 每個標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2. 推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

3. 若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。 

試劑盒 必知說明

1）只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，

2）不能混用其他制造商的產(chǎn)品，只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會得到好的檢測結(jié)果。

3）由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。

4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑盒的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)。

5）請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

6）不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，

如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。

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