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DUMABIO/篤瑪生物
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上海市
96T 2500元 200盒可售
48T 1450元 200盒可售
更新時(shí)間:2024-09-09 09:42:24瀏覽次數(shù):236次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)猴β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)酶聯(lián)免疫試劑盒
猴神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG-2)ELISA試劑盒
猴早期生長應(yīng)答蛋白4(EGR4)酶聯(lián)免疫試劑盒
供貨周期 | 一周 |
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猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)ELIISA試劑盒
試劑盒組成
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
操作步驟
1.從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本xi釋液 40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體 50μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗 板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為 0 的標(biāo)準(zhǔn)品可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,終結(jié)果乘以5才是樣本終濃度。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
6. 若中英文說明書有誤,請以中文說明書為準(zhǔn)。
7. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
8. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
猴肌酸激酶同工酶MB(CKMB)ELIISA試劑盒
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒會出現(xiàn)的問題及解決辦法:
1. 加入反應(yīng)終止液后,沒有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶標(biāo)記物。
解決辦法:請按照操作步驟進(jìn)行。
b.原因:試劑盒內(nèi)容物未能充分回。
解決辦法:確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作。
c.原因:室溫太低。
解決辦法:若室溫太低(<19℃),請于操作步驟4,適當(dāng)延長溫育時(shí)間。
d.原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。
解決辦法: 請用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。
e.原因:試劑盒已過有效期限。
解決辦法:請更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳,或是平行性不好。
a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法: 請確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
b.原因:操作時(shí)間拖太久。
解決辦法:請?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。
c.原因:微孔間相互污染。
解決辦法: 加樣品時(shí),請小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
d.原因:標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。
解決辦法:請使用已校正過的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。
e.原因:添加樣品或試劑的操作方法不正確。
解決辦法:加樣品或試劑時(shí),吸頭請勿接觸微孔。
f.原因:洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。
解決辦法:請隨時(shí)監(jiān)控洗板機(jī)洗板過程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
a.原因:室溫太高(>25℃)。
解決辦法: 若無法降低室內(nèi)溫度,請適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間。
b.原因:底物溶液受到污染。
解決辦法: 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請不要再使用。
c.原因:反應(yīng)時(shí)間超過太久。
解決辦法:請控制反應(yīng)時(shí)間。
d.原因:酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
解決辦法:使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無殘留)
4. 陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。
a.原因:微孔中的試劑未能充分混合。
解決辦法: 試劑加完后,需輕敲盤四周使其充分混合均勻。
b.原因:洗板過程發(fā)生問題(同2-f.)。
解決辦法:請參考2-f.
c.原因:添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。
解決辦法: 請參考2-d.
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