僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

猴白細胞分化抗原28(CD28)酶聯(lián)免疫試劑盒

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被相關(guān)指標的抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T（可拆）

產(chǎn)品數(shù)量：咨詢

產(chǎn)品應(yīng)用：ELISA實驗

產(chǎn)品貨期：現(xiàn)貨

有效期：6個月

保存條件：2-8℃

猴白細胞分化抗原28(CD28)酶聯(lián)免疫試劑盒

ELISA試劑盒如何操作

1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過夜包被。

2.洗滌：棄包被液（用力拍干，再用無塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。

3.封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。

4.洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。

5.結(jié)合一抗：用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢血清，每孔100μl，要設(shè)立陰性對照，37℃孵育1.5h。

6.洗滌：同上。

7.結(jié)合酶標二抗：每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同，可按說明書進行）50μl，37℃孵育1h。

8.洗滌：同上。

9.顯色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室溫避光顯色10min。

10.待顯色后，每孔加入50μl終止液（2mol/L H2SO4）終止反應(yīng)。使用酶標儀讀取450nm的OD值，以確定血清抗體水平。

以上步驟僅供參考，具體操作請根據(jù)實際情況和產(chǎn)品說明書進行。

注意事項

1. 試劑盒保存于2-8℃，切勿反復(fù)凍融或長時間保存于室溫。

2. 實驗前確保所有試劑均已恢復(fù)至室溫。

3. 加樣時注意避免產(chǎn)生氣泡。

4. 洗滌時要保證充分洗滌，避免殘留物影響實驗結(jié)果。

5. 底物溶液應(yīng)避光保存，避免長時間暴露于空氣中。

6. 酶標儀應(yīng)使用450nm波長進行讀數(shù)，其他波長可能導(dǎo)致誤差。

7. 本試劑盒僅用于科研實驗和診斷參考，不適用于臨床診斷和治療。

ELISA測定結(jié)果如何計算

1.計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX )和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX)。

2.兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值，例如0.400，試驗才有效。

3.3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，而已另兩個陰性對照重新計算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上范圍，則該次實驗無效。

4.陽性判定值按下式計算：陽性判定值=NCX+0.05。

5.標本A值>陽性判定值的為陽性，小于陽性判定值的為陰性。

需要注意的是，試劑盒的常數(shù)只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用。

洗板方法

1.手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5次。

2.自動洗板機：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

ELISA的優(yōu)點

1. 特異性高：由于是抗原抗體的特異性結(jié)合，因此試驗的特異性很高，能夠排除其他物質(zhì)的干擾。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大提高，能夠檢測出微量的抗原或抗體。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易掌握，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。

公司簡介

上海篤瑪生物科技有限公司是一家國內(nèi)合資集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物公司。專業(yè)提供各類進口品牌，研發(fā)生產(chǎn)ELISA試劑盒、細胞株、抗體、耗材、培養(yǎng)基等產(chǎn)品，并提供實驗外包，技術(shù)指導(dǎo)，操作指導(dǎo)，代做實驗，代做課題等技術(shù)服務(wù)。公司擁有研發(fā)團隊、研發(fā)平臺及現(xiàn)代化的生產(chǎn)基地，生產(chǎn)各類科研用的產(chǎn)品。 我們由衷的感謝海內(nèi)外科學家、感謝國內(nèi)外廣大科研工作者、學者予以我們鼎力的支持和理解，我們將在未來的工作中，百尺竿頭，發(fā)揮優(yōu)勢，勇于開拓、自主創(chuàng)新、敢為人先、鍥而不舍，在生命科學的道路上，不斷進取，奮發(fā)努力，瞄準國際生命科學的前沿，不斷創(chuàng)新研發(fā)新產(chǎn)品。為科研工作提供更好、更人性化的服務(wù)。

     （Shanghai Duoma Biotechnology Co. , Ltd is a domestic joint venture integrating scientific research and production as one of the specialized biological companies. We specialize in providing various imported brands, R&D and production of ELISA kits, cell strains, antibodies, consumables, culture media and other products, as well as technical services such as experimental outsourcing, technical guidance, operation guidance, experimentation and research. The company has a world-class R&D team, leading technology, cutting-edge R&D platform and modern production base to produce various scientific research products. We are sincerely grateful to scientists at home and abroad, scientific researchers and scholars at home and abroad for their strong support and understanding. In the future work, we will give full play to our advantages, dare to pioneer, independently innovate, dare to be pioneering and persevere, keep forging ahead on the road of life science, strive hard, aim at the frontier of international life science, and continuously innovate and develop new products. Provide better and more humanized services for scientific research.）

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