硫氧還蛋白還原酶（TrxR）測試盒免費待測  
    TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員。它和硫氧還蛋白(Trx)、NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。硫氧還蛋白系統(tǒng)在氧化應激、細胞增殖、細胞凋亡等過程中發(fā)揮著重要的作用。TrxR使氧化型硫氧還蛋白的殘基還原，變成一對半殘基，后者進一步成為核糖核苷酸還原的電子供體。它存在于大腸桿菌、酵母、肝臟以及腫瘤細胞中。TrxR有很多生物學功能,與人類某些疾病的發(fā)病機制也密切相關。

一、簡介

     TrxR是二聚體黃素酶,屬于吡啶核苷酸二硫化物還原酶家族的一員,廣泛表達于從原核生物到人類的各級有機體細胞中，因分布區(qū)域不同，三種同工酶分別命名為硫氧還蛋白R1(TrxR1)(細胞質(zhì)型)、TrxR2(線粒體型)和一個主要在睪丸中表達的同工酶TrxR3(又名TGR)。胞質(zhì)型TrxR1發(fā)現(xiàn)最早，分布也較廣泛，是目前研究得最多的一種同工酶。

大多數(shù)真核生物中，主要有兩套獨立的抗氧化系統(tǒng)，一套是硫氧還蛋白系統(tǒng)，一套是系統(tǒng)。硫氧還蛋白系統(tǒng)包括NADPH、硫氧還蛋白還原酶（TrxR）和硫氧還蛋白(Trx)；系統(tǒng)包括NADPH、還原酶（GR）和谷氧還蛋白（Grx）。在這兩個系統(tǒng)中，GR和TrxR分別催化電子從NADPH傳遞到G和硫氧還蛋白，使其轉(zhuǎn)為還原態(tài)，從而參加后續(xù)多種保持氧化還原平衡的反應，是保護細胞免受活性氧物質(zhì)損害的重要解毒機制。

哺乳動物硫氧還蛋白還原酶（TrxR）酶是一種硒蛋白家族，在其C末端氧化還原中心具有但必需的硒代半（Sec）殘基。TrxR，主要通過從NADPH提供電子以維持內(nèi)源性底物硫氧還蛋白（Trx）蛋白處于還原狀態(tài)，調(diào)節(jié)參與抗氧化防御，蛋白質(zhì)修復和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的各種基于氧化還原的信號傳導途徑。

二、生理功能

1. 調(diào)控氧化還原平衡

有研究證明了TrxR和它催化的Trx在抵御氧化應激過程中的作用。 線粒體有氧呼吸等生理過程產(chǎn)生的超氧陰離子（O2-）通過超氧化物歧化酶（SOD）催化或自發(fā)歧化反應產(chǎn)生大量過氧化氫（H2O2）。通過測定胞內(nèi)活性氧（ROS）發(fā)現(xiàn)類風濕性關節(jié)炎（RA）滑膜細胞中氧化應激增加，同時發(fā)現(xiàn)RA滑膜細胞TrxR1蛋白上調(diào)，進一步分析顯示，細胞通過上調(diào)TrxR1而抑制了過氧化氫和RA滑膜細胞凋亡，從而保護細胞抵御氧化應激。

1. 調(diào)控細胞生長和凋亡

TrxR活性抑制到低于正常水平會產(chǎn)生對細胞生長的抑制，核苷酸還原酶是在復制細胞或者快速生長的腫瘤細胞中特異表達的酶，細胞用TrxR抑制及等化合物處理導致核苷酸還原酶的抑制和細胞生長的抑制。

1. 調(diào)控早期胚胎發(fā)育

Marcus等人采用缺失線粒體TrxR1的小鼠突變體產(chǎn)生的胚胎，結(jié)果顯示TrxR2缺失的胚胎更小、極度貧血而且顯示肝臟中凋亡增加，體外培養(yǎng)的造血菌落與對照組相比急劇減少。

1. 參與其他生理過程的調(diào)控

TrxR可催化鹽產(chǎn)生硒化物，有間接抑制炎癥的作用。

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三、研究進展

開發(fā)高效可靠的工具對于探索基本的生物過程至關重要，一種特別有用的工具是小分子熒光探針，這使人們越來越關注設計和開發(fā)用于生物大分子，無機離子，生物小分子和各種反應性信號物種的各種化學探針。一般而言，探針的質(zhì)量對于探究復雜的生物系統(tǒng)以及從實驗觀察中得出令人信服的結(jié)論至關重要，因為質(zhì)量差的探針可能會產(chǎn)生模糊甚至誤導的結(jié)果和結(jié)論。期望的探針應該以適當?shù)捻憫俾屎透咛禺愋宰R別感興趣的靶標，這將保證探針被有把握地應用以給出特定生物事件的精確和實時解剖。先前的研究報道了一系列TrxR熒光探針，包括TRFS-green，TRFS-red和Mito-TRFS。TRFS-green是TrxR的第一個綠色發(fā)光熒光探針。

TRFS-green的反應機制

然而，TRFS-green對酶的響應速度較慢，即使使用三（2-羧乙基）膦（TCEP）作為還原劑，也需要超過2小時才能達到最大熒光信號。2019年6月21日，蘭州大學化學化工學院房建國團隊在Nature Communications上發(fā)表題為“A fast and specific fluorescent probefor thioredoxin reductase that works via disulphide bond cleavage"的文章，系統(tǒng)地研究了通過調(diào)整TrxR連接單元和識別部分來確定探針響應速率和選擇性的結(jié)構(gòu)因素。在Fast-TRFS的幫助下，開發(fā)了一種方便的測定法，使用粗細胞提取物作為TrxR的來源篩選TrxR抑制劑，并且已經(jīng)鑒定了數(shù)十種天然產(chǎn)物作為TrxR抑制劑。

生化試劑盒可以檢測的樣本類型有哪些?
  生化試劑盒的實驗原理是基于化學反應,理論上是不受生物種屬及樣本類型的限制。生化試劑盒樣本檢測通常只分樣本類型,不分種屬。但是某些指標在不同種屬或類型樣本中的提取方式不同。因此,具體情況請參見說明書或與技術支持聯(lián)系確認。

生化試劑盒樣本檢測的一般要求:
1)于生化檢測而言,樣本無溶血、脂血、的現(xiàn)象。組織樣本需將血液洗凈擦干后再進行稱重處理。
2)樣本處理后盡快進行檢測,且保存于冰盒之上,待測。
求
3)樣本需澄清,若不澄清,需離心后取上清進行檢測(特殊指標除外)。
4)樣本值應在試劑盒線性范圍內(nèi),若超過線性范圍,需稀釋后再進行檢測,若低于檢測范圍,需增加樣本濃度后進行檢測。

如何進行預測定?
(1)務必在7個工作日內(nèi)進行預測定,以確定該試劑盒是否適合您的樣品,以免造成試劑盒和樣品的浪費。
(2)選擇2~3個預期差異比較大的樣品,嚴格按照說明書進行操作,注意儀器工作狀態(tài),操作規(guī)范,控制好測定條件,尤其是溫度。
(3)如實與公司銷售溝通預測定結(jié)果,公司技術人員會確認測定結(jié)果是否正常,是否需要調(diào)整,如何進行調(diào)整,從而確保您的測定結(jié)果可靠。