細(xì)胞培養(yǎng)的一大優(yōu)勢(shì)在于能夠控制細(xì)胞繁殖的物理化學(xué)環(huán)境(即溫度、pH值、滲透壓、O2和CO2張力)和生理環(huán)境(即激素和營養(yǎng)濃度)。除溫度外,培養(yǎng)環(huán)境由生長培養(yǎng)基控制。雖然細(xì)胞培養(yǎng)的生理環(huán)境不如其物理化學(xué)環(huán)境明確,但是通過更好地了解血清成分、確定增殖所需的生長因子以及更好地了解培養(yǎng)過程中的細(xì)胞微環(huán)境(即細(xì)胞間相互作用、氣體擴(kuò)散、細(xì)胞-基質(zhì)相互作用),現(xiàn)在可以采用無血清培養(yǎng)基進(jìn)行一些細(xì)胞系的培養(yǎng)。
目前,主要有兩種基本的細(xì)胞培養(yǎng)體系,一種是使細(xì)胞在人工基質(zhì)上單層生長(貼壁培養(yǎng)),另一種是使細(xì)胞在培養(yǎng)基中自由漂浮生長(懸浮培養(yǎng))。
貼壁培養(yǎng):
來自脊椎動(dòng)物的大多數(shù)細(xì)胞,除了造血細(xì)胞系和少數(shù)其他細(xì)胞系,都是貼壁依賴性的,必須在經(jīng)過專門處理以允許細(xì)胞粘附和擴(kuò)散的合適基質(zhì)上培養(yǎng)。
懸浮培養(yǎng):
大多數(shù)市售昆蟲細(xì)胞系在單層或懸浮培養(yǎng)物中生長良好。懸浮培養(yǎng)細(xì)胞可在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),但隨著培養(yǎng)物體積與表面積之比(通常為0.2-0.5mL/cm2)的增加,阻礙了氣體的充分交換,因此需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行攪拌。這種攪拌一般通過磁力攪拌器或者旋轉(zhuǎn)瓶實(shí)現(xiàn)。
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