目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測試劑盒>> YS0247一氧化碳血紅蛋白檢測試劑盒(比色法)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | YS0247 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
一氧化碳血紅蛋白檢測試劑盒(比色法)一氧化碳中毒是含碳物質(zhì)燃燒不時的產(chǎn)物經(jīng)呼吸道吸入引起的,中毒機理是一氧化碳與血紅蛋白的親合力比氧與血紅
蛋白的親合力高上百倍,所以一氧化碳極易與血紅蛋白結(jié)合,形成碳氧血紅蛋白,使血紅蛋白喪失攜氧的能力和作用造成
組織窒息,對全身的組織細胞均有毒性作用,尤其對大腦皮質(zhì)的影響最為嚴重。
檢測原理是一氧化碳與血紅蛋白結(jié)合后,形成櫻桃紅色的碳氧血紅蛋白
(HbCO),HbCO不會被亞硫酸鹽還原,而含氧血紅蛋白(HbO2)會被還原,HbCO吸收峰在538nm,HbO2吸收峰在
578nm,取二者比值根據(jù)公式可求得HbCO含量,主要用于定量檢測人、動物血液的一氧化碳血紅蛋白或稱碳氧血紅蛋白
的含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
三、自備材料:
1、離心管或小試管
2、蒸餾水
3、酶標儀、96孔板
四、操作步驟(僅供參考):
1、配制組織勻漿液(1×)∶取10ml組織勻漿液(3×)加入20ml蒸餾水即成。
2、配制PA Assay Buffer (1x)∶取10ml PA Assay Buffer (1.5×)加入5ml蒸餾水即成。
3、準備樣品︰
①血清、尿液及其他體液樣品:血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-20°C凍存。
②組織樣品︰稱取1g組織樣品置于勻漿器中,再加入1ml組織勻漿液(1x)仔細研磨,振搖提取靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,用于PA的檢測。
③植物材料︰稱取1g植物材料置于勻漿器中,再加入1ml組織勻漿液(1×)仔細研磨,振搖提取,靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,用于PA的檢測。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的PA,可以使用原有的裂解液或PBS等進行稀釋,如雞血清可稀釋5~10倍后檢測。
4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_到60μg/ml。
注意事項:
1、實驗材料應(yīng)盡量新鮮,如取材后不立即使用,應(yīng)存于-20°C.
2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。
4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用。
5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定。
6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。
7、如果所測樣品的濃度過高,應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數(shù)帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應(yīng)采用電位滴定法。
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