目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測試劑盒>> TE0253(MAO)檢測試劑盒(醛苯腙比色法)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | TE0253 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥,綜合 |
腺苷脫氨酶(Adenosine Deaminase，ADA)是苷代謝中重要的酶類，屬于一種巰基酶，每分子至少含2個活性巰基，
ADA能催化腺呤核苷轉變?yōu)榇吸S呤核苷，再經核苷磷酸化酶作用生成次黃嘌，其代謝緩和終產物為尿酸，ADA廣泛分
布于人體各組織中，以胸腺、脾和其他淋巴組織中含量最高，而肝、肺、腎和骨胳肌等含量低。
(MAO)檢測試劑盒(醛苯腙比色法)其檢測原理是待測樣品中的ADA催化腺嘌呤核苷水解脫氨，產生次
苷和銨離子，利用波氏顯色法測定氨離子生成量，其反應公式為：腺苷+H2O→次黃呤+NH3，通過分光光度計檢測640nm
處吸光度，根據(jù)計算公式可得ADA活力，100T試劑盒可測約50個樣品。該試劑盒僅用于科研領域，
不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考)：
自備材料：
1、蒸餾水
2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管
3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板
操作步驟(僅供參考)：
1、準備樣品∶
①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉，加入2.5ml PAL Lysis Buffer，冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿，4℃ 10000r/min
離心15~20min，留取上清液，-20℃凍存，用于苯丙氨解氨酶的檢測。
②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定，-20℃凍存，用于苯丙解氨的檢測。
③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液，如果有必要需進行適當勻漿，4℃ 10000r/min離心15~20min，取上清液，
-20℃凍存，用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶，可以使用蒸餾水或PAL
Lysis Buffer稀釋進行恰當?shù)南♂尅?/span>
2、PAL加樣∶
取96孔板，按照下表設置對照孔、測定孔，溶液應按照順序依次加入，并
注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定，樣品的檢測最好能設置2平行孔，
求平均值。
加入物（μl）對照孔測定孔
蒸餾水150100
待測樣本5050
PAL Assay Buffer-50
3、PAL檢測︰
以對照孔為對照(調零)，酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為 A測定0);40℃準確孵育1h，立即加入10μl PAL終止
液終止反應(備選方案)，以對照孔為對照調零，酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。
注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟，可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零，酶標儀立即測定290nm處測定
孔的吸光度。
注意事項∶
1、待測樣品中不能含有酶抑制劑，同時需避免反復凍融。
2、獲得上清液為PAL酶液，應盡快檢測，亦可-20°℃保存。
3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板，也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿，但應注意比色杯的最小檢測體積。
4、每次檢測指標不宜過多，否則操作時間不一，有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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