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          目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測(cè)試劑盒>> TE0720總超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒

          總超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒
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          參考價(jià) 326
          訂貨量 ≥1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          326
          ≥1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 雅吉生物
          • 型號(hào) TE0720
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時(shí)間:2024-11-01 11:52:47瀏覽次數(shù):107評(píng)價(jià)

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          貨號(hào) TE0720 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合
          總超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒

          超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是含金屬輔基的酶,能催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成過氧化氫

          (H2O2)和氧氣(O2),是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶,由于超氧自由基是不穩(wěn)定的的自由基,壽命極短,SOD活性一般用間接

          方法測(cè)定,并利用各種呈色反應(yīng)來測(cè)定SOD活力,其中顯色劑有NBT(唑藍(lán)四氮)、WST-1、WST-8等。


          總超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒(NBT核黃素微板法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT)是一種基于

          NBT的光還原反應(yīng),所以又稱作NBT光還原法,檢測(cè)原理是在有氧化物質(zhì)存在下核黃素被光還原,在有氧條件下,被還原的核黃

          素極易再氧化產(chǎn)生超氧陰離子自由基(O2.-),O2.-可將氮藍(lán)四唑還原為藍(lán)色的甲腙,后者在560nm處有強(qiáng)吸收,而SOD可清除

          超氧陰離子(O2.-),從而抑制了甲腙的形成。于是光還原反應(yīng)后,反應(yīng)液藍(lán)色愈深,說明SOD活性愈低,反之酶活性愈高,

          據(jù)此通過酶標(biāo)儀比色分析就可以計(jì)算出樣品中總超氧化物岐化酶活性水平。本方法是利用SOD抑制NBT在光照下的還原作用來

          確定酶活性大小,可用于檢測(cè)植物、組織、細(xì)胞、血清或其它樣品中SOD活性。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,

          不適用于臨床診斷或其他用途。


          操作步驟(僅供參考)

          自備材料:

          1、蒸餾水

          2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

          3、低溫離心機(jī)、恒溫箱或水浴鍋、酶標(biāo)儀、酶標(biāo)板


          操作步驟(僅供參考):

          1、準(zhǔn)備樣品∶

          ①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min

          離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測(cè)。

          ②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測(cè)定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測(cè)。

          ③細(xì)胞或組織樣品∶取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,

          -20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測(cè)。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL

          Lysis Buffer稀釋進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

          2、PAL加樣∶

          取96孔板,按照下表設(shè)置對(duì)照孔、測(cè)定孔,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并

          注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行孔,

          求平均值。

          加入物(μl)對(duì)照孔測(cè)定孔

          蒸餾水150100

          待測(cè)樣本5050

          PAL Assay Buffer-50

          3、PAL檢測(cè)︰

          以對(duì)照孔為對(duì)照(調(diào)零),酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定孔的吸光度(記為   A測(cè)定0);40℃準(zhǔn)確孵育1h,立即加入10μl PAL終止

          液終止反應(yīng)(備選方案),以對(duì)照孔為對(duì)照調(diào)零,酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定孔的吸光度(記為A測(cè)定1)。

          注意︰加入PAL終止液終止反應(yīng)為非必須步驟,可37℃準(zhǔn)確孵育1h后直接以對(duì)照孔為對(duì)照調(diào)零,酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定

          孔的吸光度。

          注意事項(xiàng)∶

          1、待測(cè)樣品中不能含有酶抑制劑,同時(shí)需避免反復(fù)凍融。

          2、獲得上清液為PAL酶液,應(yīng)盡快檢測(cè),亦可-20°℃保存。

          3、如果沒有可測(cè)定紫外區(qū)的酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板,也可以使用紫外分光光度計(jì)和石英比色皿,但應(yīng)注意比色杯的最小檢測(cè)體積。

          4、每次檢測(cè)指標(biāo)不宜過多,否則操作時(shí)間不一,有可能導(dǎo)致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。




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