目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> A3203SD DNA Polymerase (10U/ul)試劑
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 250U |
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貨號 | A3203 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
SD DNA Polymerase (10U/ul)試劑是一種新型的Taq DNA聚合酶,該酶具有Bst聚合酶的強烈的鏈置換活性和類似Taq DNA聚合酶的耐熱性。SD DNA 聚合酶可耐受90℃高溫(短暫耐受92℃),且具有5'-3'聚合酶活性、5'-3'鏈置換活性,無外切酶活性,擴增速度2kb/min,最佳反應(yīng)溫度為70℃,這些特征使得該酶廣泛適用于熱變性PCDR (Polymerase Chain Displacement Reaction)、LAMP反應(yīng)、長片段擴增、富含GC片段擴增,還可用于全基因組測序(WGA)、單細胞測序和NGS建庫等領(lǐng)域。
SD DN 聚合酶在搭配Taq DNA聚合酶的組合下可進行TaqMan探針的切割,用于qPCDR的擴增。這種qPCDR 的新型方案將槽式PCR的高靈敏特性放置于單管、一步擴增完成,這種檢測策略比qPCR靈敏度高10-100 倍,并且用時更短。
單位定義
1unit指在70°C條件下,30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。
應(yīng)用
等溫擴增、LAMP、熱變性LAMP、tHDA和RCA、PCDR、全基因組測序、單細胞測序、NGS文庫構(gòu)建。
儲存
-20°C可保存2年。
SD DNA Polymerase (10U/ul)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應(yīng)用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達平臺期)。
應(yīng)用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。
應(yīng)用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。