目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> C5024Exonuclease VII試劑
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更新時(shí)間:2024-11-01 16:58:08瀏覽次數(shù):137評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 250U/2500U |
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貨號(hào) | C5024 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
Exonuclease VII試劑來源于大腸桿菌,從 5' -3' 和 3'-5'方向切割單鏈 DNA,對(duì)線性或環(huán)狀雙鏈 DNA 沒有活性。
當(dāng) PCR 完成時(shí),可以使用核酸外切酶 VII 去除寡核苷酸引物,然后再使用不同的引物進(jìn)行下一步 PCR
。核酸外切酶 VII 消化單鏈 DNA 時(shí),無需金屬離子。 本產(chǎn)品是通過重組表達(dá)核酸外切酶 VII 基因(XseA 和 XseB)
而得高純度蛋白。
組分
名稱數(shù)量
Exonuclease VII (10 U/μl)25 μl/250 μl
10X Exonuclease VII Buffer1 ml/1 mlx5
單位定義
在 50 μl 反應(yīng)體系中,37℃ 條件下,30分 鐘內(nèi)能催化產(chǎn)生 1 nmol 酸溶性核苷酸所需的酶量定義 為一個(gè)活性單位。
應(yīng)用
PCR后去除多余引物
PCR后去除硫代磷酸化寡核苷酸引物
去除雙鏈DNA中的單鏈DNA
1X Exonuclease VII Buffer
50 mM Tris-HCl (pH 8), 50 mM Na3PO4, 8 mM EDTA , 10 mM 2-mercaptoethanol。
熱失活
95℃ 10min
酶保存液
50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1M NaCl, 1 mM DTT, 50% Glycerol.
儲(chǔ)存
置于-20°C,可保存2年。
Exonuclease VII試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示
應(yīng)用實(shí)例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果,可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。
應(yīng)用實(shí)例2: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽(yáng)性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。
應(yīng)用實(shí)例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。
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