目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> C5046Tth MutS Protein試劑
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 ug |
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貨號 | C5046 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
主要用途 | 科研實驗 |
Tth MutS Protein試劑DNA錯配修復(fù)系統(tǒng)(MMR)主要由三種蛋白組成,包括MutS、MutL和MutH。其中MutS負責(zé)識別錯配或未結(jié)合位點并與
之結(jié)合,隨后MutL蛋白與MutS-DNA形成復(fù)合體,增強其穩(wěn)定性,并激活MutH的內(nèi)切酶活性,協(xié)同解旋酶和單鏈結(jié)合蛋白將
錯配序列切除。 ttMutS蛋白是一種分離自嗜熱棲熱菌(Thermus thermophilus)的DNA錯配修復(fù)蛋白,
在最適溫度 65-75℃ 范圍內(nèi),該蛋白具有依賴于DNA的ATPase 活性。 ttMutS蛋白在DNA復(fù)制中識別錯配堿基和插入堿基形成
的Loop結(jié)構(gòu),其緊密結(jié)合Loop結(jié)構(gòu)從而阻止聚合酶的延伸。因此,其可用于錯配PCR反應(yīng)(ARMS-PCR)和基因芯片中,
除此外,在基因合成中能阻止錯配的產(chǎn)生,降低基因突變率。
組分
組分名稱50 μg
Tth MutS Protein (1 μg/μl)50 μl
儲存
-20℃可保存3年。
Storage Buffer
20mM Tris-HCl,pH7.5
200mM NaCl
5mM DTT
25%甘油
Tth MutS Protein試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應(yīng)用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達平臺期)。
應(yīng)用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。
應(yīng)用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。
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