目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>ELISA試劑盒>> YS07170B豬氧化型(GSSG)Elisa試劑盒
分子式 | 免費代測 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | YS07170B |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,綜合 | 主要用途 | 科研實驗 |
產(chǎn)品名稱:豬氧化型(GSSG)Elisa試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中指標水平。用純化的指標抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入指標,再與HRP標記的-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過 洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中指標濃度。
組成:
(1)結(jié)合物及標本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),elisa試劑盒參考標準品和控制血清(定量測定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
豬氧化型(GSSG)Elisa試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
操作注意事項
1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
10.試劑盒保存:;2-8℃。
11.有效期:6個月
雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒更多產(chǎn)品歡迎前來咨詢。