Roche 12156792910 原位細(xì)胞死亡檢測試劑盒，TMR紅
羅氏Roche總部位于瑞士巴塞爾，是全球在醫(yī)藥和診斷領(lǐng)域，致力于研究并處于領(lǐng)xian地位之一的保健集團(tuán)。羅氏的診斷部門提供了獨(dú)yi無er的產(chǎn)品品種，為全shi界的研究人員、醫(yī)師、病人、醫(yī)院和實(shí)驗(yàn)室提供多樣化的創(chuàng)新測試產(chǎn)品及服務(wù)。羅氏診斷在全球有近19,000人員正致力于科研、發(fā)展、產(chǎn)品的市場運(yùn)作和服務(wù)以及一體化的解決方案。
Roche 12156792910 原位細(xì)胞死亡檢測試劑盒，TMR紅，產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品品牌：Roche
產(chǎn)品貨號：12156792910
產(chǎn)品名稱：原位細(xì)胞死亡檢測試劑盒，TMR紅
產(chǎn)品規(guī)格：50 tests
產(chǎn)品說明：
說明
一般描述
廣泛使用的方法用于確定凋亡，包括基于瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析以及基于3H-胸苷或5-溴-2′-脫氧-尿苷的DNA片段檢測。該方法包含在特定的細(xì)胞群中將片段化的低分子量DNA與未片段化的高分子量DNA進(jìn)行分離。因此，這些方法并不提供關(guān)于在特定細(xì)胞群或特別是組織切片中某個獨(dú)立細(xì)胞命運(yùn)的信息?；蛘撸?dú)立的凋亡細(xì)胞可能因其特征性的核染色質(zhì)堆疊和片段而可通過顯微鏡進(jìn)行識別，但這種方法具有主觀性并受限于形態(tài)發(fā)生最大變化這一相對窄的時間窗口。
凋亡的標(biāo)志是DNA的降解，而這在早期是對核小體間DNA連接體區(qū)域是有選擇性的。DNA的切割可能會產(chǎn)生雙鏈和單鏈的DNA斷裂（切口）。兩種類型的斷裂都可在酶促反應(yīng)中利用修飾的核苷酸（如生wu素-dUTP、DIG-dUTP、熒光素-dUTP）的游離3′-OH端標(biāo)記而被檢測到。這些酶末端轉(zhuǎn)脫氧核苷酰酶（TdT）可催化脫氧核糖核苷酸的模板非依賴性聚合至單鏈及雙鏈DNA的 3′-末端。這種方法也被稱之為TUNEL(TdT-介導(dǎo)的 dUTP-X缺口 末端標(biāo)記)。或者，游離的3′-OH基團(tuán)可能通過一種稱為切口翻譯的模板依賴機(jī)制而利用DNA聚合酶被標(biāo)記。然而，TUNEL法被視為更為敏感且快速的。
樣品材料：位于懸浮液、細(xì)胞離心涂片器以及細(xì)胞涂片制品中的細(xì)胞，生長于玻片上的粘附細(xì)胞以及冷凍和石蠟包埋的組織切片。
原理
原位細(xì)胞死亡檢測試劑盒，TMR紅是基于在凋亡的早期對單鏈和雙鏈DNA的斷裂進(jìn)行檢測。
凋亡的細(xì)胞是經(jīng)過固定和通透化處理的。隨后，這些細(xì)胞采用含有TdT以及TMR-dUTP的TUNEL反應(yīng)混合物進(jìn)行孵育。在孵育階段，TdT可催化在單鏈和雙鏈DNA的游離3′-OH基團(tuán)上加上TMR-dUTP。在洗滌后，在DNA受損位點(diǎn)插入的標(biāo)記可通過流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡進(jìn)行可視化。
試劑盒用于利用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀在單細(xì)胞水平對凋亡性細(xì)胞死亡進(jìn)行檢測和定量，以及用于利用熒光素標(biāo)記的細(xì)胞標(biāo)志物（TMR紅）進(jìn)行雙標(biāo)記。
特異性
TUNEL反應(yīng)傾向于對在凋亡過程中產(chǎn)生的DNA鏈斷裂進(jìn)行標(biāo)記。這能夠?qū)⒌蛲雠c壞死以及由細(xì)胞增殖抑制藥物或放射誘導(dǎo)的初級DNA鏈斷裂進(jìn)行區(qū)分。
應(yīng)用
原位細(xì)胞死亡檢測試劑盒，TMR紅已用于末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶生wu素-dUTP切口末端標(biāo)記（TUNEL）檢測。[1][2]它已用于凋亡檢測。[3][4]
精準(zhǔn)、快速而簡單的技術(shù)，用于利用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀對帶有紅色熒光標(biāo)記的細(xì)胞和組織在單細(xì)胞水平對凋亡的DNA片段進(jìn)行檢測和定量。[5][6]
包裝
1個試劑盒包含2種組分。
制備說明
工作濃度：酶濃度
最佳的酶濃度范圍在單個檢測0.5至5 U。對于標(biāo)準(zhǔn)的50 μl PCR，我們建議使用2 U的酶混合物。
工作溶液：將全部體積（50 μl）的酶溶液加入至剩下的450 μl標(biāo)記溶液以獲得500 μl TUNEL反應(yīng)混合物。
充分混合以平衡組分。
儲備條件 (工作溶液)：TUNEL反應(yīng)混合物應(yīng)當(dāng)在立即使用前進(jìn)行制備而不應(yīng)當(dāng)進(jìn)行儲備。將TUNEL反應(yīng)混合物置于冰上直至使用。
TUNEL反應(yīng)混合物通過將酶融合和標(biāo)記溶液在使用前混合而制備。
產(chǎn)品訂購信息：
Roche 12156792910 原位細(xì)胞死亡檢測試劑盒，TMR紅 50 tests
