Sigma C5138-1G/C5138-500MG 膠原酶 來源于溶組織梭菌
美國Sigma-Aldrich公司(美國西格瑪奧德里奇公司)是一家致力于生命科學(xué)與化學(xué)領(lǐng)域的高科技跨國公司,是世jie上最大的化學(xué)/生物試劑生產(chǎn)商和供應(yīng)商,也是全球數(shù)以百萬計的科學(xué)家和技術(shù)人員的實驗伙伴。其生物化學(xué)、有機(jī)化學(xué)試劑及試劑盒,廣泛應(yīng)用于基因組、蛋白質(zhì)組研究、生物科技、藥業(yè)、疾病診斷和化工生產(chǎn),產(chǎn)品數(shù)量超過120,000種。 美國Sigma-Aldrich公司在全球34個國家設(shè)立了分公司或辦事處,并在9個國家設(shè)立了31個生產(chǎn)基地,全球員工6800余人。公司致力于提供高精尖的科學(xué)技術(shù)與產(chǎn)品,以卓yue的品質(zhì)以及優(yōu)質(zhì)的服務(wù),加速研究者的成功步伐。
Sigma C5138-1G 膠原酶 來源于溶組織梭菌 1 g
Sigma C5138-500MG 膠原酶 來源于溶組織梭菌 500 mg
產(chǎn)品說明:
應(yīng)用
來自組織溶梭菌的膠原酶已被用于:
制備用于消化腫瘤組織的膠原mei溶液
作為磷酸鹽緩沖生li鹽水的補充劑用于消化已切除的腸系膜脂肪組織
作為羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所1640培養(yǎng)基(RPMI-1640)的補充劑用于消化結(jié)腸段
用于消化子宮內(nèi)膜組織
制備用于消化去被膜的睪丸的酶A和酶B。
膠原酶已被用于制備動脈組織,用于研究晚期糖基化終產(chǎn)物(AGE)。該酶還與其他蛋白酶一起用于人腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮和許多其他組織的解聚。它在肝臟和腎臟灌注研究,胰腺消化和非實質(zhì)肝細(xì)胞的分離中也是有效的。該酶經(jīng)過了肝細(xì)胞釋放的適用性測試,針對每只大鼠肝臟的100 mL總體積中的濃度大約為1 mg/mL。
適用于制備用于測序的單細(xì)胞懸液。
生化/生理作用
組織溶梭菌產(chǎn)生兩類膠原酶。梭菌膠原酶比哺乳動物膠原酶更高效。它在膠原三螺旋中的多個裂解位點進(jìn)行裂解。梭菌膠原酶與氣性壞疽中的細(xì)菌入侵有關(guān)。
從組織中進(jìn)行細(xì)胞的有效釋放需要膠原酶和中性dan白酶的作用。每摩爾的膠原酶可被四克的鈣原子(Ca2+)所激活。培養(yǎng)濾液中被認(rèn)為至少含有7種分子量在68-130kDa之間的不同蛋bai酶。最適pH為6.3-6.8。該酶通常用于消化組織樣品中的結(jié)締成分以釋放單個細(xì)胞。膠原酶處理可引起某些細(xì)胞的死亡。通常,使用0.1至5 mg/mL的濃度用于消化。反應(yīng)時間可從15分鐘至數(shù)小時,并在不引起過多細(xì)胞死亡的情況下達(dá)到令人滿意的細(xì)胞解離效果。優(yōu)選含有鈣和BSA的Krebs Ringer緩沖液,而且Zn2+是活性所必需的。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基yi基醚)-N,NN′,N′-四yi酸,β-巰基yi醇、谷胱gan肽、巰基乙酸和8-羥ji喹啉抑制。
注意
以原包裝形式,該產(chǎn)品在-20°C下可穩(wěn)定保存6年。在37℃、50℃和-20℃下30天內(nèi),FALGPA或蛋白酶活性沒有損失。如果分液(10mg/mL)形式快速冷凍并且在-20℃下冷凍保存,粗膠原酶的溶液可保持穩(wěn)定。進(jìn)一步的凍融步驟會破壞溶液穩(wěn)定性。 當(dāng)在冰上保持時,該產(chǎn)品可在7小時內(nèi)保持100%活性。
一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮an酸,5小時,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性dan白酶單元水解酪蛋白,產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪an酸每5小時,pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說明
溶液通常是在TESCA緩沖液(含有50mM TES、0.36mM氯化鈣,37℃時pH 7.4)中按1-2 mg/mL進(jìn)行制備。
該產(chǎn)品還含有梭菌蛋白酶、中性dan白酶和胰蛋bai酶活性。
產(chǎn)品訂購信息:
Sigma C5138-1G 膠原酶 來源于溶組織梭菌 1 g
Sigma C5138-500MG 膠原酶 來源于溶組織梭菌 500 mg