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嘔吐毒素主體成分為DON（deoxynivalenol, 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇），屬于單端孢霉烯族化合物，主要由禾谷鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、串珠鐮刀菌、擬枝孢鐮刀菌、粉紅鐮刀菌、雪腐鐮刀菌等鐮刀菌產(chǎn)生。因為該種物質(zhì)可以引起豬產(chǎn)生嘔吐癥狀，故命名為嘔吐毒素。常見于大麥，小麥，玉米等谷物飼料中；嘔吐毒素對人和動物均有很強的毒性，能引起人和動物嘔吐、腹瀉、皮膚刺激、拒食、神經(jīng)紊亂、流產(chǎn)、死胎等，豬是對嘔吐毒素zui敏感的動物。

上海安譜公司使用美國beacon 嘔吐毒素免疫親和柱以及美國 O2SI 的標(biāo)準(zhǔn)品參照GBT 23503-2009 的方法檢測面粉中的嘔吐毒素，并對其中注意點進行全面解析，給客戶提供一個完整的解決方案。

一：樣品前處理

稱取10g 面粉加入100ml 水，高速均質(zhì)1 分鐘，用玻璃纖維濾紙過濾至澄清，取2ml 濾液作為待上樣液。

二：檢測前的準(zhǔn)備和注意事項

1. 將所需的免疫親和柱在使用前回溫至室溫（20-25℃）。

2. 免疫親和柱的上下端有塑料塞子，在使用時可以取下。

3. 在使用的過程中避免免疫親和柱的干燥。例外情況為洗脫前短暫的排空和洗脫后的*排空

4. 過高的壓力或真空提取設(shè)備產(chǎn)生的負壓會壓緊凝膠而導(dǎo)致回收率降低。

三：小柱操作過程

• 將5ml 或10ml 注射器連接于免疫親和柱上端（通過小柱連接件）。

• 2ml 處理好的樣品液以1-2 滴/ 秒的速度通過親合柱，棄掉流出的液體。

• 以5ml 水淋洗柱子一次，棄掉流出的液體。

• 利用真空設(shè)備壓入空氣（約10 秒），確保排除所有的液體。

• 用1ml 甲醇緩慢洗脫（流速約為2-3 秒每滴），殘留的洗脫液使用空氣壓出或真空抽出（30 秒）并將洗脫液收集于干凈的收集管中。

• 將洗脫液吹干后加入1ml 流動相復(fù)溶，用于液相色譜檢測。

四：液相方法

色譜柱：C18-wp 150*4.6mm，5um

流動相: 甲醇：水=20:80

流速：1mL/min

柱溫：35℃

進樣量：50uL

檢測波長：218nm

五：實驗譜圖

圖一：面粉500ppb 加標(biāo)

圖二：面粉基質(zhì)空白

圖三：500ppb 標(biāo)準(zhǔn)譜圖

六：實驗數(shù)據(jù)

面粉                             樣品1                 樣品2

500ppb 加標(biāo)回收率      94.2%                80%

七：實驗注意事項

認(rèn)錯峰，誤認(rèn)為回收率為0

95% 乙酸乙酯做溶劑的嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品譜圖

VS

純甲醇做溶劑的嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品譜圖

真相

客戶把標(biāo)準(zhǔn)品里面的溶劑乙酸乙酯誤認(rèn)成嘔吐毒素的峰。從對比圖可看出：95% 乙酸乙酯做溶劑的標(biāo)準(zhǔn)品會帶來認(rèn)錯峰的干擾。

一方面因為該實驗色譜條件中檢測波長：218nm；而乙酸乙酯的紫外截止波長為256nm，這意味著，乙酸乙酯在218nm 的波長下，照樣會有吸收，就算200ug/mL（200ppm）的濃度稀釋到1ppm，其中乙酸乙酯的濃度會達到4750ppm；這樣子標(biāo)準(zhǔn)品進樣的時候乙酸乙酯會在液相色譜有一個很大的吸收，相對而言1ppm 的嘔吐毒素顯得很小，客戶很容易誤認(rèn)，后來客戶用乙酸乙酯進樣驗證確實是乙酸乙酯的峰。

另外一方面嘔吐毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)，共軛體系不強，只有一個碳碳雙鍵和羰基共軛，這樣子在218nm 下吸收不強，導(dǎo)致其相對乙酸乙酯的峰來說，峰型很小，容易被客戶忽略，當(dāng)小柱經(jīng)過上樣，淋洗步驟后，乙酸乙酯*被洗掉，洗脫液里面只有甲醇，譜圖上不會出現(xiàn)乙酸乙酯的峰，所以才會出現(xiàn)客戶做出來回收率為零的假結(jié)果。

為了*解決這個問題，安譜新推出了用甲醇做為溶劑的標(biāo)準(zhǔn)品，從源頭上*解決這個問題。

CDGG-014445-06

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（嘔吐毒素）標(biāo)準(zhǔn)品

200ug/mL 于甲醇 1mL

八：試驗中用到的耗材

快，關(guān)注上海安譜，一起漲姿勢～