液相色譜以氣體作流動相(載氣),當(dāng)樣品進(jìn)入汽化室汽化后,被載氣帶入色譜柱內(nèi),樣品中各組份在流動相和固定相之間進(jìn)行反復(fù)多次的分配,由于樣品中各組份的性質(zhì)不同,在色譜柱中兩相間的分配系數(shù)和吸附系數(shù)不同,在載氣帶動下各組份在柱子中的運(yùn)行速度也不同,經(jīng)過一定的柱長后,各組份在柱子末端分離開,然后用接在柱子后的檢測器根據(jù)組份的物理化學(xué)性質(zhì)將組份按順序檢測出來。
液相色譜流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi),不能貯存在塑料容器中。因?yàn)樵S多有機(jī)溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑劑,導(dǎo)致溶劑被污染。被污染的溶劑如用于液相色譜儀系統(tǒng),可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán),防止溶劑揮發(fā)引起組成的變化,同時防止空氣中的氧和二氧化碳溶入流動相中。
液相色譜的分類
㈠按固定相聚集態(tài)分類:
1、氣固色譜:固定相是固體吸附劑,
2、氣液色譜:固定相是涂在擔(dān)體表面的液體。
㈡按過程物理化學(xué)原理分類:
1、吸附色譜:利用固體吸附表面對不同組分物理吸附性能的差異達(dá)到分離的色譜。
2、分配色譜:利用不同的組分在兩相中有不同的分配系數(shù)以達(dá)到分離的色譜。
3、其它:利用離子交換原理的離子交換色譜:利用膠體的電動效應(yīng)建立的電色譜;利用溫度 變化發(fā)展而來的熱色譜等等。
㈢按固定相類型分類:
1、柱色譜:固定相裝于色譜柱內(nèi),填充柱、空心柱、毛細(xì)管柱均屬此類。
2、紙色譜:以濾紙為載體,
3、薄膜色譜:固定相為粉末壓成的薄漠。
磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液極易長霉,應(yīng)盡量新鮮配制使用。如需貯存,可至于冰箱內(nèi)冷藏,并且一般不要超過3天。
鹵代溶劑中可能含有微量的酸性雜質(zhì),能與液相色譜儀系統(tǒng)中的不銹鋼反應(yīng)。鹵代溶劑與水的混合物比較容易分解,不能存放太久。鹵代溶劑混合后,可能會反應(yīng)生成一些對不銹鋼有較大腐蝕性的化合物。因此,盡量不采用鹵代溶劑的混合流動相,或者使用之前新鮮配制。
此外,鹵代溶劑與一些反應(yīng)性有機(jī)溶劑(如乙腈)混合靜置時,液相色譜還可能產(chǎn)生結(jié)晶。
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