色譜柱是實(shí)現(xiàn)混合物成分有效分離的重要工具,它不僅可以用于分析型的任務(wù),如定性和定量分析,也可以用于制備型的任務(wù),如純化和制備較大量的單一物質(zhì)。
分離混合物:色譜柱能夠?qū)?fù)雜的混合物中的各組分根據(jù)它們?cè)谝苿?dòng)相(通常是液體或氣體)和固定相(柱內(nèi)填充材料)之間的相互作用差異進(jìn)行分離。
純度鑒定:通過(guò)色譜柱分離后,可以對(duì)單一物質(zhì)進(jìn)行純度鑒定,確保所需成分的純凈度。
定量分析:色譜柱還可以用于定量分析,即通過(guò)測(cè)量某個(gè)組分在色譜圖上的峰面積或峰高來(lái)確定該組分的含量。
制備純化:在制備型色譜中,色譜柱用于從混合物中純化出足夠數(shù)量的目標(biāo)物質(zhì),以便于進(jìn)一步的研究或應(yīng)用。
色譜柱有多種類型,它們可以根據(jù)用途、尺寸和填充材料來(lái)分類。
按用途分類:
分析型色譜柱:用于定性和定量分析,通常內(nèi)徑較小,如常規(guī)分析柱(內(nèi)徑2~5mm, 柱長(zhǎng)10~30cm)和窄徑柱(內(nèi)徑1~2mm,柱長(zhǎng)10~20cm)。
制備型色譜柱:用于分離純化較大量的樣品,內(nèi)徑較大,如半制備柱(內(nèi)徑>5mm)和實(shí)驗(yàn)室制備柱(內(nèi)徑20~40mm,柱長(zhǎng)10~30cm)。
按填充材料分類:
反相色譜柱:以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán),如C18 (ODS)、C8 (MOS)、C4 (B)等。適用于非極性或中等極性的化合物分離。
正相色譜柱:固定相通常為硅膠或其他具有極性官能團(tuán)的鍵合相填料,如胺基團(tuán) (NH2, APS) 和氰基團(tuán) (CN, CPS)。適用于極性化合物的分離。
按材質(zhì)分類:
不銹鋼色譜柱:是HPLC中較常見(jiàn)的類型,填充有多孔硅膠顆粒,如C18鍵合是反相HPLC的常見(jiàn)選擇。
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