關(guān)鍵詞:大鼠骨肉瘤細(xì)胞 atcc
簡(jiǎn)介：世界*品牌大鼠骨肉瘤細(xì)胞 atcc原裝，質(zhì)量保證,*。
我公司——依托復(fù)旦大學(xué)，集研發(fā)、銷售、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)服務(wù)于一體的高科技企業(yè)。專業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口胎牛血清、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、細(xì)胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高， 代做ELISA實(shí)驗(yàn)等。產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。全國(guó)范圍內(nèi)免費(fèi)快遞運(yùn)輸，如出現(xiàn)運(yùn)輸質(zhì)量問(wèn)題，我們可以包退換貨。
產(chǎn)品品牌：大鼠骨肉瘤細(xì)胞 atcc   
美國(guó)菌種保藏中心， 又稱美國(guó)模式菌種收集中心(ATCC)，是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營(yíng)的，非贏利性組織。目前它可以提供各種動(dòng)植物細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達(dá)兩萬(wàn)多種。
在生物制品方面，我公司是世界衛(wèi)生組織下屬生物標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)室（英國(guó)生物制品檢定所NIBSC和荷蘭VQC）、歐洲藥品質(zhì)量監(jiān)察會(huì)（EDQM）在中國(guó)的進(jìn)口商，同時(shí)我部門也在代理進(jìn)口一些其他菌種保藏機(jī)構(gòu)的產(chǎn)品，比如德國(guó)國(guó)家菌種保藏中心(DSMZ)、英國(guó)國(guó)立標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏中心(NCTC)等，為國(guó)內(nèi)科研以及生產(chǎn)用戶提供細(xì)胞株、菌株等生物標(biāo)準(zhǔn)品。
收到后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意：傳代后一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。
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無(wú)菌操作注意事項(xiàng):
1）操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。
2）點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。
3）操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。
4）不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。
5）瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。
6）吸溶液的吸管等不能混用。
標(biāo)準(zhǔn)蛋白表達(dá)服務(wù) 
1. 克隆目標(biāo)蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體上；
2. 制備重組bacmid DNA；
3. bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞，制備P1和P2病毒stock；
4. P2病毒滴度測(cè)定
5. 重組蛋白表達(dá)評(píng)估和條件優(yōu)化；
6. 小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化（500 ml培養(yǎng)物）；
7. 大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化（可選）。 
病毒制備服務(wù) 
1. 克隆目標(biāo)蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體上；
2. 制備重組bacmid DNA；
3. bacmid DNA轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞，制備P1和P2病毒stock；
4. P2病毒滴度測(cè)定（滴度108－109）；
5. 蛋白表達(dá)驗(yàn)證；
6. P3病毒制備（可選，zui多可制備3L重組桿狀病毒）。 
注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。