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液相色譜柱按色譜固定相基質(zhì)分可以分為哪幾個(gè)分類
閱讀：4543發(fā)布時(shí)間：2018-11-24
1.1反相色譜柱：
反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相性較，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是性較組合被沖出，而性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
1.2正相色譜：
正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)，以及其他具有性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN，CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的性較，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的性大小，即性弱的組份被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相性相對(duì)比固定相低，如：正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
1.3離子交換色譜柱：
以磺化交聯(lián)陰/陽(yáng)離子鍵合硅膠色譜柱，常用規(guī)格：陰離子色譜柱(SAX)，陽(yáng)離子交換色譜柱(SCX)
2.聚合物基質(zhì)：
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要點(diǎn)是在PH值為1～14均可使用。相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有更的疏水性；大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非?！，F(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低。
聚合物基質(zhì)在流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí)都會(huì)出現(xiàn)膨脹或收縮。用于HPLC的交聯(lián)度聚合物填料，其膨脹和收縮要有限制。溶劑或小分子容易滲入聚合物基質(zhì)中，因?yàn)樾》肿釉诰酆衔锘|(zhì)中的傳質(zhì)比在陶瓷性基質(zhì)中慢，所以造成小分子在這種基質(zhì)中柱效低。對(duì)于大分子像蛋白質(zhì)或合成的聚物，聚合物基質(zhì)的效能比得上陶瓷性基質(zhì)。因此，聚合物基質(zhì)用于分離大分子物質(zhì)。
3.其他無(wú)機(jī)填料：
其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其的性質(zhì)，一般于的用途。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ)，不再需其它的表面改性，該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更，石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體，又由于HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解，這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC，氧化鋁微粒剛性，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床，其點(diǎn)是可在PH達(dá)12的流動(dòng)相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也，應(yīng)用范圍受到一定的限制，所以未能應(yīng)用，型氧化鋯填料也可用于HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用PH范圍1～14，溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料幾年才開(kāi)始研究，加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度，其重要用途與勢(shì)尚在進(jìn)行中。
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