寄生菌吸器產(chǎn)生效應(yīng)子并轉(zhuǎn)運(yùn)到寄主細(xì)胞中
目前的很多研究證明吸器是活體營(yíng)養(yǎng)真菌和卵菌效應(yīng)子產(chǎn)生的主要場(chǎng)所,并起著將效應(yīng)子轉(zhuǎn) 運(yùn)到寄主植物中的作用。目前,已經(jīng)從M. lini鑒定 出30余個(gè)無毒基因,從P. graminis、P. striiformis 和P. triticina中鑒定出近50個(gè)無毒基因。通過 基因組學(xué)研究和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究,已經(jīng)從吸器中獲 得了大量的(500–1500個(gè))候選效應(yīng)蛋白。本課題 組從P. triticina的吸器產(chǎn)生階段篩選到300余個(gè)候 選效應(yīng)蛋白,經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn),這些效應(yīng)蛋白不具有保守的氨基酸保守結(jié)構(gòu),多態(tài)性非常強(qiáng)。杜冬冬對(duì)2個(gè)不同致病力小麥葉銹菌株的150個(gè)候選 分泌蛋白進(jìn)一步進(jìn)行Pfam分析,結(jié)果得到注釋的 分泌蛋白僅有36個(gè)。剩余的114個(gè)分泌蛋白使用MEME軟件進(jìn)行de novo結(jié)構(gòu)篩選和預(yù)測(cè),結(jié)果在 15 個(gè)分泌蛋白中預(yù)測(cè)到3個(gè)保守結(jié)構(gòu)域,分別是 motif 1(YxxxxNKxDC)、motif 2(Y [N/A] Y [T/D] [H/A] [C/A] [S/H] [T/Q] [S/N] [S/G] [N/C]T [N/A] W)和motif 3([S/K] M [H/A] R [R/M] R [P/A] [W/Q])。剩余的99個(gè)P. triticina的分泌蛋白含有新 的功能motif。Godfrey等通過構(gòu)建Bgh的cDNA 文庫(kù)發(fā)現(xiàn)了菌分泌蛋白的保守結(jié)構(gòu)域Y/F/C。 根據(jù)此保守結(jié)構(gòu)進(jìn)行 EST 文庫(kù)比較,在 P . striiformis和U. maydis中都發(fā)現(xiàn)了有此結(jié)構(gòu)的分泌 蛋白。本課題組在研究P. triticina中發(fā)現(xiàn),在大量 的候選分泌蛋白中也存在著Y/F/C的保守結(jié)構(gòu)域,而其他不產(chǎn)生吸器的真菌和卵菌中沒有此結(jié) 構(gòu),說明這類分泌蛋白只特異的在有吸器的真菌 中表達(dá)。這些效應(yīng)蛋白的產(chǎn)生均證明吸器是產(chǎn)生 效應(yīng)子的
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