遠(yuǎn)慕生物:ELISA試劑盒檢測方法的利弊
日前,我公司實驗室技術(shù)部人員來到公司總部,當(dāng)日下午會議討論ELISA試劑盒檢測方法的利弊,王總、何副總,各部門代表人員及全部技術(shù)人員參與。會中,技術(shù)人員們主要介紹了ELISA的直接法和間接法。會后,技術(shù)代表歐陽將內(nèi)容整理出發(fā)給了編輯部分享給各位朋友們。
一、直接法
將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
1.優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運(yùn)用二抗可防止交互反響。
2.缺陷:實驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費(fèi)用相對進(jìn)步。
二、間接法
此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
1.優(yōu)勢:二抗能夠加強(qiáng)信號,并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它zui多的免疫反響性。
2.缺陷:交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。
被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要當(dāng)心選擇,才可防止交互反響或競爭一樣的抗原部位。
1.優(yōu)勢:高活路,高專一性,抗原無須事前純化。
2.缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體部位。
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