對動態(tài)范圍進行量化需要一個運算公式,即動態(tài)范圍值 = 20 log (well depth/read noise),其中Well depth代表是滿井電子,是CCD飽和時能接受的電子信號總值,read noise是讀出噪聲(以電子數來表示),每個CCD在讀數的過程中都會產生噪聲,噪聲越小,監(jiān)測靈敏度越高。其中滿井電子與CCD的bit值是相關的,通常下,bit值越高,滿井電子的數值越大。
舉例如下:
Well depth = 85,000 個電子, read noise = 12 個電子
Dynamic range = 20 log (85,000/12), or 77dB.
動態(tài)范圍的值越高CCD性能越好.
(3)、量子效率
CCD的量子效率也稱像素靈敏度,指在一定的曝光量下,像素勢阱中所積累的電荷數與入射到像素表面上的光子數之比。不同結構的CCD其量子效率差異很大。比如100光子中積累到像素勢阱中的電荷數是50個,則量子效率為50%(100 photons = 50 electrons means 50% efficiency)。值得注意的是CCD 的量子效率與入射光的波長有關。
(4)、信噪比
說到信噪比就不得不提到暗電流了,
暗電流是導致CCD噪音的很重要的因素。暗電流指在沒有曝光的情況下,在一定的時間內,CCD傳感器中像素產生的電荷。我們在做化學發(fā)光檢測的時候,需要的曝光的時候比較長,這樣導致CCD產生較多的暗電流,對圖像的質量影響非常大。通常情況下通過降低CCD的溫度來較為大限度的減少暗電流對成像的
影響。CCD產生的暗電流隨著溫度下降而減少,但是在-23℃下開始趨于平緩,由此可以得出溫度并非需要無休止的降低的。所以在選擇冷CCD時,溫度在-25℃(溫度,非室溫以下)下一般就可以達到您的要求了。
有的CCD是在圖像較為終生成后,通過軟件去背景來扣除暗電流,對于信號遠遠強于背景的有一定效果,但是對于弱信號處理過程中會產生越來越多的錯誤。
(5)、光學鏡頭
光學鏡頭是機器視覺系統(tǒng)中*的部件,直接影響成像質量的優(yōu)劣,影響算法的實現(xiàn)和效果。光學鏡頭規(guī)格繁多,有時不免頭暈。光學鏡頭從焦距上可分為短焦鏡頭、中焦鏡頭,長焦鏡頭;從視場大小分有廣角、標準,遠攝鏡頭;結構上分有固定光圈定焦鏡頭,手動光圈定焦鏡頭,自動光圈定焦鏡頭,手動變焦鏡頭、自動變焦鏡頭,自動光圈電動變焦鏡頭,電動三可變(光圈、焦距、聚焦均可變)鏡頭等。
(6)濾光鏡片
熒光:EB 、TLC plates、GFP plates、SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYPRO Red、SYPRO Orange、Texas Red、Rhodamine Red、Fluorescein、Deep Purple、Cy2、Cy3、Cy3.5、Cy5、熒光板等
(要根據具體的激發(fā)光源和濾鏡來決定)
| 激發(fā)波長 | 吸收波長 | 染料 |
Blue | 475nm | 537nm | SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYPRO Orange、Cy2等 |
Green | 534nm | 606nm | SYPRO Red、Cy3等 |
Red | 632nm | 609nm | Texas Red、Rhodamine Red 、Cy5等 |
凝膠成像系統(tǒng)特點:
暗箱模具成型,小巧美觀、抗干擾、密封性好!
專業(yè)化凝膠圖像分析軟件,全中文操作界面,自動識別8 bit、10bit、12 bit、16 bit圖像,友好的人機界面,操作簡便,功能強大,可對凝膠圖像進行采集、編輯、分析及管理
日本原裝高分辨率變焦光學鏡頭
安全實用的凝膠切割工作裝置
全電腦控制所有操作過程,高度程序化(電腦控制暗箱/紫外及白光/光圈/變焦/焦距)
定時關機:用戶可自行設定定時關閉紫外光源的時間
拍攝范圍:較為大成像面積21cm×26cm
光源:多個輔助光源包括紫外透照,白光透照,紫外反射,白光反射等
主要功能:
1.凝膠圖像剪輯處理,標記;
2.自動尋找凝膠條帶;
3.與公用的標準條帶或自選的標準條帶比較;
4.條帶(泳道)遷移路徑的校正;
5.核酸、蛋白的處理,計算相應的分子量等數值;
6.詳細的分析結果可輸出成EXCEL格式,根據需要編輯。
適用范圍:
從整體總的來說凝膠成像(系統(tǒng))可應用于:蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析
?。?)分子量定量
對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要準確很多。
?。?)密度定量
一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標準條帶進行密度標定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
(3)密度掃描
在分子生物學和生物工程研究中,我們較為常用到的是對蛋白表達產物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統(tǒng)的方法就是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結合現(xiàn)在實驗室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
?。?)PCR定量
PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量并計算其占總和的百分數,密度掃描時并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。
凝膠成像的分類:
(1)普通凝膠成像分析系統(tǒng):可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進行圖象采集并進行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見樣品成像);
(2)化學發(fā)光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像;
?。?)多色熒光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像;
(4)多功能活體成像分析系統(tǒng):UV,EB,化學發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物,及大型型動物。
較為后是品牌推薦:
進口品牌美國的市場上見的是相對比較多的有:UVP、伯樂、alpha、SIM、KODAK、GE、Wealtec等;德國品牌主要有:Royal、Raytest等;英國品牌:UVI、Fedbio等;以色列DNR;荷蘭Isogen等等。目前這些國內進口品牌和國產品牌的差不多,但是價格肯定是高于國產品牌。
中國本土企業(yè)也掌握了凝膠成像核心技術,性能方面不比進口差,價格又比進口的低,本土的品牌大致上可見:北京六一、君意東方、上海領成、上海培清、上海山富、上海復日、上海嘉鵬、上海勤翔、江蘇捷達等品牌。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。