《藥典規(guī)格》2015版規(guī)定,供試品中微生物的回收可采用平皿法、薄膜過(guò)濾法或MPN法。其中,常接觸的薄膜過(guò)濾法是實(shí)驗(yàn)室zui普遍的;那么,什么是薄膜過(guò)濾法呢?
薄膜過(guò)濾法所采用的濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45μm,直徑一般為50mm,若采用其他直徑的濾膜,沖洗量應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。供試品及其溶劑應(yīng)不影響濾膜材質(zhì)對(duì)微生物的截留。濾器及濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌。使用時(shí),應(yīng)保證濾膜在過(guò)濾前后的完整性。水溶性供試液過(guò)濾前先將少量的沖洗液過(guò)濾以潤(rùn)濕濾膜。油類供試品,其濾膜和濾器在使用前應(yīng)充分干燥。為發(fā)揮濾膜的zui大過(guò)濾效率,應(yīng)注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜表面。供試液經(jīng)薄膜過(guò)濾后,若需要用沖洗液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量一般為100ml??倹_洗量不得超過(guò)1000ml,以避免濾膜上的微生物受損傷。 取照上述“供試液的制備” “接種和稀釋” 和“抗菌活性的去除或滅活” 制備的供試液適量(一般取相當(dāng)于1g、1ml或10c㎡的供試品,若供試品中所含的菌數(shù)較多時(shí),供試液可酌情減量),加至適量的稀釋液中,混勻,過(guò)濾。用適量的沖洗液沖洗濾膜。 若測(cè)定需氧菌總數(shù),轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板上;若測(cè)定霉菌和酵母總數(shù),轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上。按表1規(guī)定條件培養(yǎng)、計(jì)數(shù)。每株試驗(yàn)菌每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。同法測(cè)定供試品對(duì)照組及菌液對(duì)照組菌數(shù)。
在了解到什么是薄膜過(guò)濾法后,就要向大家普及下所使用的儀器;由于藥典中提到要用到水系濾膜,那么盛放濾膜的容器就是我公司生產(chǎn)的STV系列薄膜過(guò)濾器了;由不同的試驗(yàn)樣品數(shù)決定,儀器可以分為兩聯(lián),三聯(lián)及六聯(lián);
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