影響elisa酶聯(lián)免疫試劑盒效果的解決方法
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響效果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)異的檢測(cè)試劑,嚴(yán)峻按照試劑闡明書進(jìn)行操作,操作前將elisa試劑盒在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣可能原因:1)血清或血漿標(biāo)本分別欠好即進(jìn)行加樣;2)手工操作中,加樣板過(guò)多構(gòu)成加樣后放入孵箱前等候時(shí)間過(guò)長(zhǎng);3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。解決辦法:1)標(biāo)本為血清:將血液先天然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管,采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2)加樣后及時(shí)放入孵箱。3)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。4)如果選用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5)標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育可能原因:1)孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸騰,吸附于孔壁,難于清洗*;2)孵育時(shí)間人為延伸,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:1)貼封片或加蓋;2)按闡明進(jìn)程嚴(yán)峻控制操作時(shí)間。
4 洗板可能原因:1)選用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。2)選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量缺少,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。3)反應(yīng)板過(guò)多構(gòu)成洗板等候時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法:1)保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙上輕輕拍干;2)合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
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