色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透粉性,延長柱子的使用壽命非常重要。因此對液相色譜柱的維護是關鍵。因為樣品中經(jīng)常會含有能夠吸附在色譜柱固定相上的雜質化合物,所以應該經(jīng)常對色譜柱進行清洗或沖洗。當色譜柱在多次進樣后顯示出柱效降低時,有必要采用適當?shù)牧鲃酉鄬?strong>色譜柱進行處理,沖洗除去吸附在固定相上的污染物和樣品殘余物。
方法如下:
1.將色譜柱從系統(tǒng)上取下,反向連接到輸液泵上。色譜柱出口不要連接到檢測 器上,以免污染檢測器流動池。
注意:大多數(shù)的硅膠基質色譜柱反相沖洗沒有問題,但是聚合物基質色譜柱并不能如此操作,在反相沖洗色譜柱之前后與色譜柱生產(chǎn)商確認,反向沖洗流動相流速不要太大。
2.沖洗溶劑的選擇要考慮分析的樣品和使用的流動相條件,一般清洗流動相強度應該比流動相更強,但是條件應該盡可能的溫和。
A. 用適當?shù)娜軇_洗色譜柱的鹽和強添加劑。
B. 用比分析流動相更強的溶劑沖洗,該溶劑與流動相組成相同但不含鹽和酸。
C. 如果認為B沒能*清洗干凈色譜柱,用100%zui強溶劑沖洗。
在清洗色譜柱時,用與流動相組成相同的溶劑,但是如果使用其他的溶劑,重要的是要考慮到溶劑之間的互溶性,另外不要用強酸和強堿。
下圖是采用不同洗脫能力的流動相沖洗色譜柱時的色譜圖,可見色譜柱上的雜質逐漸被洗脫下來。
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