T960 PCR儀的可靠性、耐久性和反應(yīng)過(guò)程步驟
T960 PCR儀的可靠性和耐久性:
除了性能和通量能力外,也應(yīng)當(dāng)能夠承受一定的重復(fù)使用、環(huán)境壓力以及運(yùn)輸條件。一些生產(chǎn)廠商可能會(huì)對(duì)儀器如何進(jìn)行可靠性和耐久性的檢測(cè)進(jìn)行過(guò)報(bào)道。
相應(yīng)的PCR儀檢測(cè)包括:
組件可靠性:機(jī)械裝備會(huì)被用于對(duì)經(jīng)常使用的儀器組件如熱蓋、控制面板/觸摸屏以及溫度循環(huán)模塊進(jìn)行重復(fù)的測(cè)試。
環(huán)境壓力:可使用環(huán)境艙來(lái)模擬常規(guī)實(shí)驗(yàn)的不同條件,如溫度、濕度以及海拔。
運(yùn)輸檢測(cè):可根據(jù)安全運(yùn)輸協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行激烈的沖擊和振動(dòng)檢測(cè),以確保儀器可在無(wú)受損的工作條件下運(yùn)達(dá)。
T960 PCR儀反應(yīng)過(guò)程有以下3個(gè)步驟:
1、變性
將反應(yīng)體系混合物加熱到94℃,維持較短時(shí)間,使目標(biāo)DNA雙螺旋的氫鍵斷裂,形成單鏈DNA作為反應(yīng)模板。
2、退火
將反應(yīng)體系冷卻至特定的溫度(引物的TM值左右或以下),引物與DNA模板的互補(bǔ)區(qū)結(jié)合,形成模板引物復(fù)合物。
3、延伸
將反應(yīng)體系的溫度提高到72℃并維持一段時(shí)間,引物在耐熱聚合酶的作用下,以引物為固定起點(diǎn),以4種單核苷酸作為底物合成新的DNA鏈。
以上三步作為一個(gè)循環(huán)重復(fù)的進(jìn)行,每一循環(huán)的產(chǎn)物作為下一循環(huán)的模板。如此循環(huán)數(shù)十次,從而使目的基因得到指數(shù)級(jí)擴(kuò)增,達(dá)到檢測(cè)或獲取基因的目的。
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