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          Takara真香推薦—簡便好用的液態(tài)活檢解決方案之游離DNA篇

          來源:重慶市華雅干細胞技術有限公司   2020年10月12日 09:45  
           
           
          在腫瘤早期篩查研究領域,循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)一直是各大廠商、科研工作者關注的重點。雖然ctDNA的應用日趨成熟,但總有一些微量的ctDNA樣本無法用傳統(tǒng)技術完成高品質文庫的構建,特別是在進行腫瘤早期診斷有重要價值的稀有突變分析時。
          如何以微量ctDNA起始構建可準確分析稀有突變的文庫?Takara的解決方案是引入分子標簽技術!
           
          微量ctDNA樣本無法準確分析稀有變異? 自帶1600萬分子標簽的建庫技術了解一下
          ThruPLEX Tag-Seq Kit是Takara推出的采用莖環(huán)形接頭,含1600萬種分子標簽的DNA-Seq文庫構建技術,足以準確區(qū)分是測序錯誤還是真實的稀有突變!
           
          同時,該產品支持1-50 ng cfDNA起始,微量樣本的文庫構建不再是難題!
          ThruPLEX單管操作、手動15 min、總共兩小時,過程中無需轉管與純化,實驗小白也能輕松上手!
           
           
          實驗案例
           
          分別以10 ng及30 ng的cfDNA標準樣品(Horizon Diagnostics)起始,使用ThruPLEX Tag-seq kit制備文庫,然后使用Agilent SureSelect靶向序列富集系統(tǒng)定制Panel(110 KB),或Roche的NimbleGen SeqCap EZ定制Panel(240 KB)進行富集,使用illumina的NGS平臺進行測序。得到的數據使用Curio(Curio Genomics)分析。
          使用Agilent (30 ng DNA input)或Roche(10 ng DNA input)兩者中的任意一個靶向富集系統(tǒng)時,可以得到與已知的MAF(Minor Allele Frequency)同等的結果。
          (數據來源于Takara Bio USA, Inc.)
           
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          實驗友好型的ctDNA稀有突變分析方案
          可能有些剛開展ctDNA稀有變異分析項目的朋友會有所擔心,即便能簡便快捷地構建NGS文庫,但后期如果沒有易用的生信分析流程,一樣會成為項目研發(fā)的阻礙。
          No Worries!以下三款生信分析工具,搭配ThruPLEX Tag-Seq使用,效果更佳!

          ConnorGitHub平臺上一款開放型的生信工具,可以處理ThruPLEX Tag-Seq文庫的測序數據。Connor可以aligned BAM文件作為輸入量,分析分子標簽信息,并生成含對應序列的BAM文件,后續(xù)可結合突變分析軟件進行分析,如FreeBayes等。
          CurioCurio Genomics公司所推出的基于“云”的生信平臺,ThruPLEX Tag-Seq文庫的測序數據可以上傳、處理及可視化。該平臺運行速度快,用戶界面友好,具有強大的Alignment Viewer。同時,Curio整合了變異檢測、分析及可視化的模塊,方便用戶使用。
          Strand NGS由Strand Life Sciences推出的原生支持ThruPLEX Tag-Seq數據分析的生信平臺,提供NGS數據的分析、管理及可視化。

           

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