Formalin Fixed and Paraffin Embedded
FFPE樣本作為生物和醫(yī)學領域的重要樣本來源,廣受研究者的青睞。由于樣本固定和儲存過程中,容易發(fā)生核酸的降解和損傷,因此獲得符合測序質(zhì)量要求的文庫通常很具有挑戰(zhàn)性。那么面對做DNA-Seq的FFPE樣本,應該如何應對呢?
“想要隨心所欲的進行FFPE-DNA樣本文庫構建”,
這個神器值得擁有
?
【SMARTer ThruPLEX DNA-Seq Kit】
“飛一般感覺”的操作
FFPE樣本珍貴,擔心在文庫制備時損失?選擇它吧。
該試劑盒利用ThruPLEX技術,通過使用特殊的莖環(huán)形接頭,實現(xiàn)了更加簡潔高效的實驗流程和更短時間的手動操作。從起始DNA樣本到可用于上機測序的文庫僅需要三步2小時的操作。特別需要說明的是,整個操作是在一個反應管中即可完成,中間不需要純化,能很大程度的減少樣本的污染和損失!
技術概要:
(圖片來源于Takara Bio Inc.)
“*”的文庫質(zhì)量
FFPE樣本降解嚴重,害怕不能得到高質(zhì)量文庫?選擇它吧。
Takara嚴謹?shù)臄?shù)據(jù)評測:使用100 ng的FFPE-DNA樣品,分別使用本試劑盒、A公司試劑盒和B公司試劑盒制備文庫,然后使用Illumina NextSeq 500(2×76bp)測序分析。相比于其他公司試劑盒,以FFPE樣品起始時,使用本試劑盒可以獲得多樣性更好的文庫。另外,使用本試劑盒制備的文庫,在不同GC含量范圍內(nèi)可以產(chǎn)生更均勻的覆蓋分布。
(數(shù)據(jù)來源于Takara Bio Inc.)
“經(jīng)得起檢驗”-文獻引用加持
說得好不如做得好,應用文獻的真實反饋可供參考,選擇它吧。
2018年7月20日發(fā)表在《npj Genomic Medicine》題為Recurrent loss of heterozygosity correlates with clinical outcome in pancreatic neuroendocrine cancer的文章。本研究利用全基因組測序技術(WGS)分析了胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤的拷貝數(shù)變異情況,結(jié)果表明,胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的染色體雜合性的缺失與臨床預后相關。實驗以3-50 ng的微量FFPE-DNA樣本起始,使用ThruPLEX-FD Kit(現(xiàn)為ThruPLEX DNA-Seq Kit)制備文庫,并通過WGS與微陣列結(jié)果來驗證拷貝數(shù)變異(CNV)。
以上內(nèi)容都佐證了以降解樣本起始時,使用該試劑盒可以得到高品質(zhì)的文庫!
所以,恰好您要用FFPE樣本進行基因組分析,恰好我有SMARTer ThruPLEX DNA-Seq Kit。世間好物雖多,但它值得嘗試!
重慶市華雅干細胞技術有限公司擁有TAKARA授權Clontech品牌代理,正品現(xiàn)貨,歡迎咨詢!
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。