酵母蛋白抽提試劑盒說(shuō)明書
Yeast Protein Extraction Kit
目錄號(hào):K0890
保存:蛋白酶抑制劑混合物:-20℃
其它組分:室溫
組分說(shuō)明
Catalog no. K0890 K0890A
Kit Size 25 次 100 次
Yeast Protein Extraction Reagent 25 ml 100 ml
蛋白酶抑制劑混合物 250 μl 1 ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
酵母蛋白抽提試劑用于從酵母細(xì)胞中快速,高效而溫和地抽提可溶性蛋白。采用試劑處理,可以避免激烈的機(jī)械處理造成的氧化和熱度升高對(duì)目的蛋白的破壞作用。使用方便,避免了重復(fù)性差的研磨法,超聲波法或壓榨法對(duì)酵母細(xì)胞的破壞。本抽提試劑可用于提取啤酒酵母、裂殖酵母、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌及革蘭氏陽(yáng)性菌的蛋白抽提。與傳統(tǒng)方法相比,
處理得到的提取液中可溶蛋白產(chǎn)量大,活性高,提取快速;提取液可以直接用于 Ni-NTA 、GST 等親和純化。酵母蛋白抽提試劑盒中帶有蛋白酶抑制劑混合物,可有效避免蛋白提取過(guò)程中蛋白的降解。
注意事項(xiàng)
1. 提取液中含有去污劑,不宜使用受去污劑干擾的蛋白定量方法。
2. 為了獲得實(shí)驗(yàn)j效果,請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整Z佳使用量。
3. 本產(chǎn)品僅用于科研。
操作步驟
1. 酵母培養(yǎng)液3000 xg,4℃,離心5分鐘(離心后馬上抽提或置于-20℃或-80℃保存)。
2. 請(qǐng)?jiān)诘鞍壮樘崆叭〕鰧?shí)驗(yàn)所需蛋白抽提試劑進(jìn)行預(yù)冷, 按照1:99比例加入蛋白酶抑制劑混合物(例如990μl抽提試劑中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物),使蛋白酶抑制劑混合物在抽提試劑中成1×工作液。
注意:在進(jìn)行蛋白抽提前2-3分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑混合物。
3. 按照每50 mg酵母加入500 μl酵母蛋白抽提試劑加入抽提液,渦旋振蕩或上下吸打使酵母充分重懸。
4. 將細(xì)胞懸液置于冰上,孵育20分鐘(每間隔幾分鐘輕微搖晃一下)。
5. 12,000 rpm(13,400 xg)離心10分鐘取上清(可提取超過(guò)90%的可溶性蛋白,如有需要,可將沉淀進(jìn)行第二次蛋白抽提)。
6. 上清可進(jìn)行下一步的蛋白含量測(cè)定、純化及分析。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
|
| ||
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。