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          酵母蛋白抽提試劑盒說(shuō)明書

          來(lái)源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2020年11月09日 15:00  

                                                                                                                              

          酵母蛋白抽提試劑盒說(shuō)明書

           

          Yeast Protein Extraction Kit

          目錄號(hào):K0890   

          保存:蛋白酶抑制劑混合物:-20℃

              其它組分:室溫  

           

          組分說(shuō)明

           

          Catalog no.                   K0890       K0890A

          Kit Size                      25  次       100  次

          Yeast Protein Extraction Reagent           25 ml       100 ml

          蛋白酶抑制劑混合物                         250  μl        1 ml

           

          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

           

                酵母蛋白抽提試劑用于從酵母細(xì)胞中快速,高效而溫和地抽提可溶性蛋白。采用試劑處理,可以避免激烈的機(jī)械處理造成的氧化和熱度升高對(duì)目的蛋白的破壞作用。使用方便,避免了重復(fù)性差的研磨法,超聲波法或壓榨法對(duì)酵母細(xì)胞的破壞。本抽提試劑可用于提取啤酒酵母、裂殖酵母、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌及革蘭氏陽(yáng)性菌的蛋白抽提。與傳統(tǒng)方法相比,

          處理得到的提取液中可溶蛋白產(chǎn)量大,活性高,提取快速;提取液可以直接用于 Ni-NTA  、GST 等親和純化。酵母蛋白抽提試劑盒中帶有蛋白酶抑制劑混合物,可有效避免蛋白提取過(guò)程中蛋白的降解。

           

          注意事項(xiàng)

           

           1. 提取液中含有去污劑,不宜使用受去污劑干擾的蛋白定量方法。

           

           2. 為了獲得實(shí)驗(yàn)j效果,請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)調(diào)整Z佳使用量。

           

           3. 本產(chǎn)品僅用于科研。

          操作步驟  

           

           1.  酵母培養(yǎng)液3000 xg,4℃,離心5分鐘(離心后馬上抽提或置于-20℃或-80℃保存)。

           

           2.  請(qǐng)?jiān)诘鞍壮樘崆叭〕鰧?shí)驗(yàn)所需蛋白抽提試劑進(jìn)行預(yù)冷,  按照1:99比例加入蛋白酶抑制劑混合物(例如990μl抽提試劑中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物),使蛋白酶抑制劑混合物在抽提試劑中成1×工作液。

           

               注意:在進(jìn)行蛋白抽提前2-3分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑混合物。

           

           3.  按照每50 mg酵母加入500  μl酵母蛋白抽提試劑加入抽提液,渦旋振蕩或上下吸打使酵母充分重懸。

           

           4.  將細(xì)胞懸液置于冰上,孵育20分鐘(每間隔幾分鐘輕微搖晃一下)。

           

           5.  12,000 rpm(13,400 xg)離心10分鐘取上清(可提取超過(guò)90%的可溶性蛋白,如有需要,可將沉淀進(jìn)行第二次蛋白抽提)。

           

           6.  上清可進(jìn)行下一步的蛋白含量測(cè)定、純化及分析。

           

           

           

          實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

          ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

          CCK8檢測(cè)

          HE染色

          蛋白相互作用分析

          Western Blot

          免疫組化IHC染色

          熒光定量PCR

          動(dòng)物模型服務(wù)

          流式細(xì)胞檢測(cè)

          免疫熒光染色

          激光共聚焦

          DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

          石蠟/冰凍切片

          透射電鏡服務(wù)

          掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

          蛋白雙向(2-D)

          動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

          免疫共沉淀

          原位雜交(FIsh)

          蛋白質(zhì)純化

          分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

          組蛋白甲基化磷酸化乙?;?/a>

           

          蛋白雙向2D-WB

           

          藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

           

          番紅O固綠染色

          明膠酶譜MMP

          酶活性檢測(cè)

          動(dòng)物造模/模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)

           

          免責(zé)聲明

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