1.小鼠過敏性哮喘模型
BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2 mg/mL)和DBP溶液(0.5 mg/kg),第21~23天連續(xù)3天以0.5%的OVA溶液霧化激發(fā),每天于上午下午固定時間霧化2次,每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化,后一次霧化結(jié)束后24小時,小鼠摘眼球取血,取支氣管肺泡灌洗液( Bronchial Alveolar Lavage, BALF )及肺組織。
2.枸櫞酸誘發(fā)豚鼠咳嗽實驗
取體重200-260 g豚鼠,雌雄各半,置于500 mL的觀察室內(nèi),以恒定壓力噴入17.5%的枸櫞酸,噴霧1 min,觀察并記錄豚鼠在5 min之內(nèi)的咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù),將咳嗽潛伏期≤10 s或≥120 s,以及5 min內(nèi)咳嗽次數(shù)≤10次或者≥50次的豚鼠全部剔除。預選合格的豚鼠經(jīng)體重隨機分層分組,即模型組、咳必清組、各劑量給藥組,每組6只。各組連續(xù)灌胃給藥7天,每天一次,模型組豚鼠灌以等體積生理鹽水。末次給藥后1 h,按上述篩選條件引咳豚鼠,觀察并記錄各豚鼠咳嗽潛伏期及5 min內(nèi)咳嗽次數(shù),并與模型組比較。
3.氨水誘發(fā)小鼠咳嗽實驗
18-22 g ICR小鼠,雌雄各半,按體重隨機分層分組,即模型組、咳必清組、各劑量給藥組。各組連續(xù)灌胃給藥7天,每天一次,模型組小鼠灌以等體積生理鹽水。末次給藥后1 h,將小鼠置于一倒置的容積為500 mL,內(nèi)置一棉球的燒杯中,在向棉球上滴加0.4 mL濃氨水時開始計時,觀察并記錄小鼠咳嗽潛伏期和3min內(nèi)咳嗽次數(shù),并與模型組比較。
4.大鼠急性咽炎模型
清潔級SD大鼠,雌雄各半,用喉頭噴霧器于大鼠咽部噴體積分數(shù)15%氨水, 每次噴 3 撳,相當于6μl 15%氨水停留在大鼠咽部。每天上、下午各 1 次,連續(xù) 3 d,造成急性咽炎模型;每日觀察記錄各組動物外觀狀態(tài),并觀察動物咽部情況,包括黏膜形態(tài)、色澤等。
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