液氮研磨儀采用了特殊的垂直上下震動模式,通過研磨珠(氧化鋯、鋼珠、玻璃珠、陶瓷珠)的高頻往復(fù)振動、撞擊、剪切,快速的實現(xiàn)目的。使研磨的樣品具有更加充分、更均勻、樣品重復(fù)性更好、樣品之間沒有交叉污染。
研磨方法:
空缽先用液氮預(yù)冷,再將研棒的上端用紗布包裹(用力時手不會痛),組織建議切成薄片,研磨時不易濺出,也更容易磨碎,研棒建議頂著手心,這樣便于用力。研磨過程中要避免液氮干涸,研磨至細(xì)粉即可。待液氮剛蒸發(fā)完時,用一個小藥勺取出所需用量進(jìn)行下一步實驗或者將組織粉末裝人容器內(nèi),保存于一70℃的溫度下,以備下一步實驗用。使用得當(dāng)?shù)囊旱心ソM織法,將為下一步實驗成功奠定了基礎(chǔ)。值得一提的是,操作中所有接觸的器皿及耗材須清洗干凈并消毒。如果研磨組織用于提取RNA時,使用的器皿及耗材必須采用焦碳酸二乙醋(DEPC)滅活RNase并進(jìn)行高壓消毒處理。
注意事項:
1.液態(tài)氮在常壓時的溫度相當(dāng)?shù)牡?,一旦與物體表面接觸將迅速地沸騰,同時也會帶走相當(dāng)大量的熱能。因此,使用液態(tài)氮時須額外注意,避免與皮膚的直接接觸。
2.研缽要用瓷質(zhì)的,當(dāng)然研杵也一樣,倒液氮的量要視你研缽的大小和實驗材料的量而定,建議你用小一點的研缽,這樣研磨的時候材料比較集中好研一點,液氮倒研缽體積的一半即可。
3.把樣品放入研缽中,倒入少量液氮,液氮就會像沸騰了一樣,這時候迅速研磨。動作一定不要太大,最好是用手心的力量往下旋轉(zhuǎn)著碾碎,動作太大會把樣品濺飛,如果樣品量很少直接就可能磨沒了。大約幾秒沸騰就結(jié)束,再磨幾下就可以再加入點液氮,重復(fù)以上過程,直到認(rèn)為磨得比較細(xì)了為止。
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