細胞周期(cell cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。細胞分裂期又稱M期。細胞通過M期一分為二,有的可繼續(xù)分裂進行周期循環(huán),有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細胞周期暫時停止分裂的一個階段。但在一定適宜刺激下,又可進入周期(圖1),合成DNA與分裂。G0期的特點為:在未受刺激的G0細胞,DNA合成與細胞分裂的潛力仍然存在;當G0細胞受到刺激而增殖時,又能合成DNA和進行細胞分裂。根據(jù)各個期細胞DNA的含量將細胞周期用G0/G1期、S期和G2/M期來表示,通過核酸染料標記,并由流式細胞儀進行分析,可以得到細胞各個時期的分別狀態(tài),計算出G0/G1期、S期和G2/M期細胞的比例,了解細胞的周期分布及細胞的增殖活性。當然,也可以通過檢測細胞周期蛋白對細胞周期進行精確的分期,但常用的檢測方法還是利用流式細胞儀進行分析。細胞周期分析常用于腫瘤的早期診斷、腫瘤的良惡性判斷、觀察細胞的增殖狀態(tài)及周期分布和抗腫瘤治療的療效監(jiān)測等。
在進行流式細胞儀檢測細胞周期分布的時候,應(yīng)注意以下幾點:首先,消化細胞的時候,胰酶消化的時間不宜過長,防止對細胞膜的損傷。其次,細胞樣品的采集要保證足夠的細胞濃度,以大于106為宜。第三,細胞固定時,75%乙醇溶液固定效果較好,且固定時間不宜過長,固定后的細胞盡量隨即上機檢測,4℃保存時間不要過長。提前計劃好實驗,提前預(yù)約流式細胞儀的使用時間
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