色譜柱是高效液相色譜儀重要的核心部件。色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2-20um(5-10um),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應(yīng)。
液相色譜柱的選擇一般基于分離規(guī)模、分析物的性質(zhì)、色譜柱規(guī)格和填料的性質(zhì)幾個原則。
1、根據(jù)分離規(guī)模確定選擇分析型色譜柱還是制備型色譜柱。
2、根據(jù)分析物的pKa、log P值、分子量、化學(xué)結(jié)構(gòu)等確定其溶解性,確定合適的分離模式和色譜柱。
3、色譜柱確定后,根據(jù)色譜柱柱長和內(nèi)徑對于分離的影響選擇合適的柱長和內(nèi)徑。
4、根據(jù)填料的基質(zhì)——粒徑、孔徑、比表面積,硅膠純度、顆粒形狀、機械強度,鍵合相、鍵合密度、封端等情況確定合適的色譜柱,即完成高效液相色譜柱的選擇。
現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目,根據(jù)以上原則可以給我們提供一個初步的選擇,但由于各個儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異,即使都是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能。所以在選擇色譜柱時要結(jié)合自己的需求才能找到合適的色譜柱。
液相色譜柱的選擇一般基于分離規(guī)模、分析物的性質(zhì)、色譜柱規(guī)格和填料的性質(zhì)幾個原則。
1、根據(jù)分離規(guī)模確定選擇分析型色譜柱還是制備型色譜柱。
2、根據(jù)分析物的pKa、log P值、分子量、化學(xué)結(jié)構(gòu)等確定其溶解性,確定合適的分離模式和色譜柱。
3、色譜柱確定后,根據(jù)色譜柱柱長和內(nèi)徑對于分離的影響選擇合適的柱長和內(nèi)徑。
4、根據(jù)填料的基質(zhì)——粒徑、孔徑、比表面積,硅膠純度、顆粒形狀、機械強度,鍵合相、鍵合密度、封端等情況確定合適的色譜柱,即完成高效液相色譜柱的選擇。
現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目,根據(jù)以上原則可以給我們提供一個初步的選擇,但由于各個儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異,即使都是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能。所以在選擇色譜柱時要結(jié)合自己的需求才能找到合適的色譜柱。
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