沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的用途與應(yīng)用！

一、背景

沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基又名SDA培養(yǎng)基或者沙氏培養(yǎng)基，英文名字是Sabouraud Dextrose Agar，是通用型的真菌培養(yǎng)基，屬于營養(yǎng)培養(yǎng)基中的一種，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基屬于一種改性的沙氏瓊脂，主要用來培養(yǎng)和區(qū)分真菌，并且這種培養(yǎng)基一般會和抗生素一起使用，通過使用沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基可以將真菌和細菌材料中的病原體真菌分離出來。沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基主要就是用來鑒別和培養(yǎng)真菌，尤其是那些皮膚真菌。有些也會用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈區(qū)沉降菌和浮游菌中真菌的鑒定。

沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基含糖量比較高，并且其PH值比較低，這種特性非常有利于真菌的生長，并且可以有效的抑制細菌的生長。真菌學(xué)蛋白胨提供氮源、硫源和礦物質(zhì)及維生素。通過沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)生長出的真菌可以保留其典型的形態(tài)學(xué)特征，也因此可以通過形態(tài)學(xué)特征的不同對菌種進行鑒定。

二、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的用途

1、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基可以用來培養(yǎng)和鑒別皮膚真菌和其他真菌，并且也可以將細菌中的真菌進行分離。

2、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基還可以檢測化妝品中的微生物的檢測。

3、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基可以用來測定視頻中真菌的數(shù)量。

4、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基可以幫助臨床上對于酵母和真菌感染的甄別。

5、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基可以鑒定是哪些真菌引起的皮膚感染。

6、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基還可以從被真菌和細菌污染的樣品中將致病性真菌分離出來，沙氏葡萄糖瓊脂也可以作為Pagano-Levin培養(yǎng)基的基礎(chǔ)用于分離白色念珠菌,每升培養(yǎng)基加0.1g紅四氮唑。向培養(yǎng)基中加入上述抗生素可以抑制細菌和非致病性真菌。25°C培養(yǎng)3天后，白色念珠菌菌落未被染色或淺粉色，其它念珠菌和其它真菌則形成深粉色或紅色菌落。

三、應(yīng)用

用于ZafA基因沉默對煙曲霉菌生長、毒力的影響研究：

探討ZafA基因在煙曲霉菌生長、毒力中的重要性,為肺曲霉病新的治療方法提供理論依據(jù)。

方法：

用化學(xué)合成法合成siRNA,通過電轉(zhuǎn)染技術(shù)將siRNA轉(zhuǎn)入煙曲霉菌孢子,提取總mRNA,進行RT-PCR,觀察ZafA基因mRNA表達變化。將經(jīng)過不同處理的煙曲霉菌孢子通過鼻內(nèi)接種于麻醉后的免疫力低下小鼠,通過G試驗、觀察小鼠死亡率、肺部病理改變等,了解曲霉菌在體內(nèi)的生長、毒力情況,并將肺組織于沙氏瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng),確定其感染的特異性及真菌的生長情況。

結(jié)果：

1、電轉(zhuǎn)染后,siRNA干預(yù)組煙曲霉菌ZafA基因mRNA表達水平與18srRNA內(nèi)參的比值為0.533±0.026,較錯義鏈對照組1.098±0.027和PBS對照組1.082±0.012明顯降低(P＜0.05)；

2、轉(zhuǎn)染后siRNA干預(yù)組煙曲霉菌在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上生長較錯義鏈對照組及PBS對照組明顯受限(P<0.05)；

3、小鼠免疫指標(biāo):IgG造模前后分別為0.69±0.04、0.33±0.07;IgA 0.71±0.05、0.51±0.06;IgM 1.41±0.08、1.04±0.10(P＜0.05);(4)G試驗檢測(1-3)-β-D葡聚糖的含量,ZafA基因siRNA干預(yù)組較其余兩對照組明顯降低(P＜0.05)。

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