5kV低電壓設(shè)計(jì)、無(wú)需染色的低電壓臺(tái)式透射電子顯微鏡
在透射電子顯微鏡成像實(shí)驗(yàn)中,生物樣品的成像操作為復(fù)雜,成像難度大。這主要是因?yàn)閭鹘y(tǒng)透射電子顯微鏡過(guò)高的加速電壓引起的。
上圖為各種元素在傳統(tǒng)透射電子顯微鏡的不同照射電壓的反沖能量統(tǒng)計(jì)圖。可以發(fā)現(xiàn)電子束加速電壓在20kv就已經(jīng)到達(dá)了碳碳單鍵的臨界反沖能量,超過(guò)就很有可能使碳碳單鍵發(fā)生斷裂,即使*強(qiáng)的碳碳三鍵的臨界反沖能量也僅僅在80 kV,這也是為何大多數(shù)生物樣品在電鏡觀察的時(shí)候使用了透射電子顯微鏡的·低電壓80 kV。因此,傳統(tǒng)透射電子顯微鏡在對(duì)由C/H/O/N等元素組成的生物樣品進(jìn)行成像時(shí)就需要使用重金屬鹽離子進(jìn)行負(fù)染。
負(fù)染是在使用傳統(tǒng)透射電鏡對(duì)生物樣品成像時(shí)“不得不”采用的樣品處理手段,負(fù)染的處理手段會(huì)帶來(lái)諸多的問(wèn)題。負(fù)染會(huì)導(dǎo)致生物樣品制樣復(fù)雜,樣品容易產(chǎn)生收縮、膨脹、破碎以及內(nèi)含物丟失等結(jié)構(gòu)改變,重金屬鹽離子本身會(huì)對(duì)生物樣品的形貌造成不可逆的損害,且負(fù)染液在電鏡觀察時(shí)容易產(chǎn)生“假象”。負(fù)染的操作對(duì)于制樣者的要求較高,生物樣品的種類(lèi)多種多樣,而每種生物樣品負(fù)染時(shí)佳的制樣條件(重金屬鹽溶液的種類(lèi)、濃度、染色的時(shí)間長(zhǎng)短等)都不樣。這就需要制樣人員根據(jù)各自實(shí)驗(yàn)室的條件,在長(zhǎng)時(shí)間地摸索與多次地試錯(cuò)來(lái)獲取佳的制樣條件,大量寶貴的時(shí)間和樣品就這樣浪費(fèi)在負(fù)染制樣條件的摸索中了。
Delong公司推出的LVEM5生物型透射電子顯微鏡,完·美地解決了以上的問(wèn)題。LVEM5生物型透射電鏡采用的5kV低電壓設(shè)計(jì),對(duì)生物樣品不會(huì)造成任何損傷,與傳統(tǒng)高壓電鏡相比,低電壓反而提高了生物樣品成像的襯度/反差;無(wú)需重金屬染液負(fù)染,對(duì)生物樣品成像條件溫和,擺脫了染液與負(fù)染過(guò)程本身可能對(duì)生物結(jié)構(gòu)造成的損害,所得圖像為“正像”,更加真實(shí)地展現(xiàn)生物樣品的結(jié)構(gòu)征。
上圖分布為傳統(tǒng)電鏡和LVEM5生物型透射電鏡對(duì)未染色的小鼠心肌切片(上)和有機(jī)納米顆粒(下)的成像實(shí)例。可以看到,傳統(tǒng)高壓透射電鏡本身就會(huì)帶來(lái)樣品細(xì)節(jié)損失,在80-120kV下的透射電鏡成像過(guò)程中,未染色的生物樣品和大量十幾納米尺寸的顆粒會(huì)直接被“擊穿”。而LVEM5生物型透射電鏡采用的5kV低電壓設(shè)計(jì),不僅避免了傳統(tǒng)高壓透射電鏡長(zhǎng)時(shí)間照射對(duì)于生物樣品的損害,還可以保留下更多地小有機(jī)顆粒圖像,獲得更多地細(xì)節(jié)。
LVEM5生物型透射電鏡可以對(duì)外泌體、脂質(zhì)體、噬菌體、病毒、細(xì)胞切片等生物樣品進(jìn)行無(wú)負(fù)染成像,所得的圖像襯度更高。如下圖所示。
LVEM5技術(shù)點(diǎn):
高襯度:低能量電子對(duì)有機(jī)分子產(chǎn)生更強(qiáng)烈的散射,具有更高對(duì)比度。
無(wú)需染色:突破以往生物/輕材料成像需要重金屬染色的局限性。
高分辨率:無(wú)染色條件下能夠達(dá)到1.5 nm的圖像分辨率。
多模式:LVEM5能夠在TEM、SEM、STEM三種模式中自由切換。
高效方便:真空準(zhǔn)備只需要3分鐘,空間小,環(huán)境需求低。
易操作且成本低:友好智能化操作界面,低耗材,低維護(hù)費(fèi)用,無(wú)需業(yè)操作人員。
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1、低電壓臺(tái)式透射電子顯微鏡-LVEM5(生物域)
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