皮膚致敏試驗(yàn)替代法ADRA，無(wú)需使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即可檢測(cè)化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮膚是否會(huì)造成過(guò)敏反應(yīng)。

　　現(xiàn)其適用范圍得到擴(kuò)大，其檢測(cè)混合物的方法已收錄于OECD測(cè)試準(zhǔn)則，可用于評(píng)估化妝品、洗滌劑或消毒劑等各領(lǐng)域產(chǎn)品中使用的天然提取物等的安全性。

富士膠片株式會(huì)社（總部：東京都港區(qū)，總裁兼董事?CEO：后藤禎一）非常高興地通知廣大客戶，無(wú)需使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即可檢測(cè)化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮膚有無(wú)過(guò)敏反應(yīng)的皮膚致敏試驗(yàn)ADRA（Amino acid Derivative Reactivity Assay）已作為混合物^※1的皮膚致敏試驗(yàn)方法收錄于OECD（經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織）測(cè)試準(zhǔn)則^※2。此次收錄,“ADRA“可評(píng)測(cè)物質(zhì)（被測(cè)物質(zhì)）不再是單一物質(zhì)，還能檢測(cè)混合物，并且有效性驗(yàn)證測(cè)試中也確認(rèn)了*的再現(xiàn)性。作為國(guó)際上可靠的檢測(cè)方法被OECD認(rèn)可，對(duì)普及"ADRA "法產(chǎn)生了重要推動(dòng)力。

皮膚致敏測(cè)試是為了調(diào)查皮膚與化學(xué)物質(zhì)接觸時(shí)，引發(fā)的過(guò)敏反應(yīng)誘導(dǎo)的炎癥（皮疹）發(fā)生的皮膚致敏性。該測(cè)試用于產(chǎn)品規(guī)劃和生產(chǎn)前，評(píng)估新開(kāi)發(fā)的化學(xué)物質(zhì)和使用化合物的安全性。近年來(lái)，因人們健康意識(shí)的提高，開(kāi)始廣泛運(yùn)用天然提取物開(kāi)發(fā)化妝品和洗滌劑等產(chǎn)品，所以需要可評(píng)估混合物皮膚致敏性的測(cè)試方法。“ADRA”在皮膚致敏性發(fā)生過(guò)程^※3之一的“化學(xué)物質(zhì)和蛋白的結(jié)合”，作為混合物測(cè)試方法收錄于OECD測(cè)試準(zhǔn)則，可滿足上述需求。

FUJIFILM運(yùn)用化學(xué)合成和分子設(shè)計(jì)的經(jīng)驗(yàn)生產(chǎn)的高靈敏度反應(yīng)試劑，于2017年開(kāi)發(fā)了高精度的可評(píng)估化學(xué)物質(zhì)皮膚致敏性的皮膚致敏試驗(yàn)“ADRA”。2019年，“ADRA”作為檢測(cè)單一物質(zhì)的皮膚致敏性測(cè)試法收錄于OECD測(cè)試準(zhǔn)則。之后，F(xiàn)UJIFILM在不斷改良“ADRA”測(cè)試法的同時(shí)，還致力于開(kāi)發(fā)針對(duì)混合物的皮膚致敏試驗(yàn)。

FUJIFILM通過(guò)更改常規(guī)“ADRA”的檢測(cè)方法實(shí)現(xiàn)了混合物的皮膚致敏性評(píng)估。具體變更有以下兩項(xiàng)，①反應(yīng)試劑與被測(cè)樣品混合時(shí)，被測(cè)樣品制備的方法從以往的摩爾濃度^※4變更為質(zhì)量濃度^※5，②除了吸光檢測(cè)儀^※6以外，還使用熒光檢測(cè)儀^※7作為檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)行的分析儀器，根據(jù)不同的樣品使用不同的檢測(cè)儀器可高精度檢測(cè)多種混合物的皮膚致敏性。

此外，在同一實(shí)驗(yàn)室和不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行的再現(xiàn)性測(cè)試^※8結(jié)果顯示，實(shí)現(xiàn)了*再現(xiàn)性。以此作為有效性驗(yàn)證測(cè)試，收錄于OECD。

現(xiàn)在，FUJIFILM為普及開(kāi)發(fā)的”ADRA”法，由富士膠片和光純藥公司推出了能簡(jiǎn)單操作的“ADRA試劑盒”（2018年9月發(fā)售），以及使用相同試劑盒評(píng)估皮膚致敏性的委托服務(wù)（2022年4月開(kāi)始）。未來(lái)，針對(duì)天然提取物的皮膚致敏試驗(yàn)，如化妝品、洗滌劑和消毒劑中使用的植物提取物等混合物，FUJIFILM將積極向化妝品公司、化工產(chǎn)品廠家和檢驗(yàn)委托機(jī)構(gòu)推廣“ADRA”，以進(jìn)一步普及該測(cè)試法。

“確保產(chǎn)品和化學(xué)物質(zhì)的安全”是FUJIFILM 2030年度目標(biāo)CSR計(jì)劃“可持續(xù)發(fā)展的價(jià)值計(jì)劃 2030”的一項(xiàng)重要課題。今后，我們將繼續(xù)通過(guò)開(kāi)發(fā)化學(xué)物質(zhì)安的全性評(píng)估技術(shù)，為降低化學(xué)物質(zhì)對(duì)環(huán)境和健康的危害作出貢獻(xiàn)。

　　※1　由多種成分組成的化學(xué)物質(zhì)。

　　※2　OECD是以國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化評(píng)估化學(xué)物質(zhì)特性和安全性的測(cè)試方法為目的的準(zhǔn)則。

　　※3　引起皮膚致敏的過(guò)程有三種，分別為“化學(xué)物質(zhì)與蛋白的結(jié)合”，“皮膚細(xì)胞響應(yīng)”，“樹(shù)狀細(xì)胞響應(yīng)”。

　　※4　溶液濃度的表示方法之一。目標(biāo)物質(zhì)溶解在1 L溶液中的物質(zhì)的量。

　　※5　溶液濃度的表示方法之一。目標(biāo)物質(zhì)溶解在1 L溶液中的重量。

　　※6　通過(guò)紫外線的照射，檢測(cè)吸收190 nm~900 nm波長(zhǎng)的光的物質(zhì)以及該物質(zhì)吸光度的儀器。

　　※7　通過(guò)照射特定波長(zhǎng)的光，檢測(cè)發(fā)出220nm~900nm波長(zhǎng)的光的物質(zhì)以及該物質(zhì)熒光強(qiáng)度的儀器。

　　※8　實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性測(cè)試是驗(yàn)證在同一實(shí)驗(yàn)室中更改測(cè)試條件（測(cè)試時(shí)間，測(cè)試人員等）進(jìn)行相同的測(cè)試，驗(yàn)證能否獲得相同測(cè)試結(jié)果的測(cè)

　　　　 試。實(shí)驗(yàn)室間再現(xiàn)性測(cè)試是指在多個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)室使用相同的測(cè)試條件，驗(yàn)證能否獲得相同測(cè)試結(jié)果的測(cè)試。

◆皮膚致敏試驗(yàn)替代法ADRA

以往的ADRA使用方法

●　使用FUJIFILM開(kāi)發(fā)的高靈敏度檢測(cè)反應(yīng)試劑（以下，ADRA試劑）進(jìn)行的代替性皮膚致敏試驗(yàn)。無(wú)需使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，即可評(píng)估化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮膚有無(wú)過(guò)

　  敏反應(yīng)。ADRA試劑含有萘環(huán)的氨基酸衍生物的分子結(jié)構(gòu)，因此可通過(guò)紫外光高靈敏度檢測(cè)。

●　評(píng)估單一物質(zhì)的皮膚致敏性時(shí)，制備ADRA試劑和被測(cè)樣品摩爾濃度比恒定的反應(yīng)溶液，使用高效液相色譜儀（HPLC）的吸收檢測(cè)器檢測(cè)未與被測(cè)樣

　  品結(jié)合的ADRA試劑的量。由于可高靈敏度檢測(cè)，與傳統(tǒng)方法“直接多肽反應(yīng)試驗(yàn)（DPRA）”^※9相比，可檢測(cè)約1/100量的被測(cè)樣品。

為使用ADRA法評(píng)估混合物的皮膚致敏性而對(duì)常規(guī)檢測(cè)方法作出的改變

①　變更為質(zhì)量濃度

　　由于天然提取物的成分往往不明，無(wú)法計(jì)算被測(cè)物質(zhì)的摩爾濃度，所以FUJIFILM尋找合適的質(zhì)量濃度（0.5mg/mL），變更被測(cè)樣品的制備方法為

　　質(zhì)量濃度。

②　有效運(yùn)用熒光檢測(cè)儀

　　以往使用的吸收檢測(cè)儀，可能會(huì)無(wú)法正確檢測(cè)和定量沒(méi)有與樣品結(jié)合的ADRA試劑的量，因此在使用ADRA試劑時(shí)，可有效運(yùn)用HPLC的熒光檢測(cè)儀

　　檢測(cè)會(huì)發(fā)出熒光的萘環(huán)。若使用光度檢測(cè)儀無(wú)法正確檢測(cè)和定量的被測(cè)物質(zhì)，可在使用吸收檢測(cè)儀的基礎(chǔ)上使用熒光檢測(cè)儀。

　　上述兩點(diǎn)的變更，可檢測(cè)混合物以及無(wú)法與被測(cè)樣品結(jié)合的ADRA試劑量。

　　為驗(yàn)證檢測(cè)方法變更所獲得的測(cè)試結(jié)果的有效性，于2019年10月~2020年12月進(jìn)行了再現(xiàn)性測(cè)試。在五個(gè)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)10種化合物各進(jìn)行了三次評(píng)估，調(diào)查在同一實(shí)驗(yàn)室和不同實(shí)驗(yàn)室之間是否可以獲得相同的測(cè)試結(jié)果，結(jié)果證明為*的再現(xiàn)性。

　　※9　肽與化學(xué)物質(zhì)反應(yīng)后，通過(guò)HPLC檢測(cè)結(jié)合的殘留肽來(lái)評(píng)估皮膚致敏性的方法。

◆相關(guān)產(chǎn)品

　　ADRA試劑盒