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          慢性阻塞性肺病(COPD)小鼠模型的建模方法

          來源:上海達(dá)為科生物科技有限公司   2022年10月28日 10:37  

          實(shí)驗(yàn)周期:4-6 weeks

          建模方法:

          主要試劑: 紅金龍香煙(湖北中煙工業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn),烤煙型,每支含焦油量9mg、煙氣煙堿量0.7mg、煙氣一氧化碳量12mg),脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,美國Sigma公司),TNF-alpha和IL-18 ELISA試劑盒cloud-clone公司)。
          建模方式:SPF小鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,采用鼻腔滴入LPS加熏香煙的方法建立COPD小鼠動物模型分別于第1、29經(jīng)鼻腔滴入LPS(30μg/6μL),第2-30天(除第29天)采取熏香煙法,將小鼠放入自制的玻璃熏箱,10支/次,30min/次,5d/周,共4周。

          模型評價
          一般觀察:一般情況空白對照組小鼠無死亡,毛發(fā)光澤,呼吸均勻,活動正常;模型對照組小鼠毛發(fā)無光澤,部分有脫毛現(xiàn)象,躁動,熏煙時喜扎堆,倦怠蜷縮,汗出,腹部脹大,呼吸急促,出現(xiàn)點(diǎn)頭運(yùn)動,甚者張口呼吸明顯。

          小鼠肺功能檢測看小鼠氣道阻力、動態(tài)肺順應(yīng)性、最大呼氣流量、吸氣時間、呼氣時間、

          組織病理學(xué)
          肺組織形態(tài)學(xué)檢測:
          腹腔麻醉小鼠后,開胸暴露胸腔:取左側(cè)肺葉固定于10%甲醛溶液24h,常規(guī)脫水石蠟包埋,切片行HE染色,光鏡下觀察。
          空白對照組小鼠肺泡結(jié)構(gòu)清晰,肺泡大小均勻,氣道黏膜上皮結(jié)構(gòu)完整,纖毛排列整齊;模型對照組小鼠部分肺泡壁塌陷,肺泡不規(guī)則擴(kuò)大并相互融合,形成肺大泡,肺間質(zhì)內(nèi)可見不同程度的炎性細(xì)胞浸潤,支氣管黏膜上皮脫落,黏膜皺襞增多,突入管腔,纖毛黏縮,管腔變窄,符合COPD病理改變。

          標(biāo)志因子水平
          TNF alpha、Il-18檢測:
          最后一次煙熏完后24小時內(nèi)處死,按0.05mL/10g)腹腔麻醉小鼠,將小鼠腹主動脈取血法取血1mL,室溫下放置2h后,2 000r/min離心20min,取血清,-20℃保存?zhèn)溆?。按ELISA試劑盒操作步驟說明檢測小鼠血清中TNFalpha、


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