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          多糖涂敷型手性柱(反相流動(dòng)相)沖洗方法

          來(lái)源:廣州綠百草科學(xué)儀器有限公司   2022年11月11日 14:46  

          當(dāng)手性色譜柱分離度下降、

          柱壓過(guò)高等色譜柱異?,F(xiàn)象發(fā)生時(shí),

          才需要使用本方法沖洗

          以下沖洗步驟及流動(dòng)相體系僅適用于大賽璐多糖涂敷型反相手性柱AD-RH/AD-3R,AS-RH/AS-3R,AY-RH/AY-3R,AZ-RH/AZ-3R,OD-R/OD-RH/OD-3R,OJ-RH/OJ-3R,OX-RH/OX-3R,OZ-RH/OZ-3R,流速僅適用于3/5/10µm, 4.6*150/250mm規(guī)格,對(duì)于其他規(guī)格的手性柱,其沖洗時(shí)所用的流速請(qǐng)根據(jù)各自所能耐受柱壓不同另行調(diào)整。


          1、一般情況下,使用常規(guī)方法沖洗色譜柱;若常規(guī)方法無(wú)效,則使用特殊方法一沖洗色譜柱;若特殊方法一無(wú)效,則使用特殊方法二沖洗色譜柱。

          2、沖洗過(guò)程中,10µm柱柱壓請(qǐng)勿超過(guò)3Mpa,5µm柱柱壓請(qǐng)勿超過(guò)6Mpa,3µm柱柱壓請(qǐng)勿超過(guò)15Mpa。

          3、以下沖洗過(guò)程中涉及的流速僅供參考,實(shí)際操作中以柱壓不超過(guò)以上說(shuō)明為宜。

          4、以下沖洗過(guò)程中提到的20倍柱體積,以4.6*150mm規(guī)格柱為例,約為30mL。



          沖洗方法

          常規(guī)方法:

          1、用水/甲醇或水/乙腈(80/20,v/v或85/15,v/v),流速0.5ml/min,沖洗20倍柱體積;

          2、沖洗結(jié)束,驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn),看是否柱效有提高。

          特殊方法一:

          1、 用水/甲醇(90/10,v/v),流速0.5 ml/min,沖洗20倍柱體積;

          2、逐漸提高甲醇的比例到100%,然后以甲醇100%,0.3ml/min左右的流速,沖洗20倍柱體積;

          3、逐漸增加水的比例至90%,即水/甲醇(90/10,v/v);

          4、沖洗結(jié)束,驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn),看是否柱效有提高。

          特殊方法二:

          1、用水/甲醇(90/10,v/v),流速0.5 ml/min,沖洗20倍柱體積;

          2、逐漸提高甲醇的比例到100%,然后以甲醇100%,0.3ml/min左右的流速,沖洗20倍柱體積;

          3、再用酸性流動(dòng)相,甲醇/三氟·乙酸(100/0.1,v/v),0.3ml/min的流速,沖洗20倍柱體積;

          4、再用中性流動(dòng)相甲醇過(guò)渡,甲醇100%,0.3ml/min的流速,沖洗20倍柱體積;

          5、逐漸增加水的比例到90%,即水/甲醇(90/10,v/v);

          6、沖洗結(jié)束,驗(yàn)柱或重復(fù)之前的樣品實(shí)驗(yàn),看是否有提高柱效。





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