高壓消毒滅菌鍋

微生物檢測這個命題相信大家都不會陌生，畢竟我們都是從事這方面工作的。在實驗室里，我們需要跟各種檢測方法、細(xì)菌真菌以及檢測設(shè)備等打交道，對微生物檢測領(lǐng)域也肯定會存在這樣或者那樣的問題，面對這些問題你是怎么解決的？你有哪些好的微生物檢測工作經(jīng)驗？歡迎投稿分享你的心得體會圖片圖片圖片。

　　今天，分享給朋友們一篇關(guān)于“GB 50346-2011《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》建設(shè)實驗室心得體會”的好文章，歡迎圍觀。

　　實驗室建設(shè)需要考慮的因數(shù)比較多，具體分以下幾個方面：

　　一、實驗室安全級別定位。

　　首先就檢測實驗室的定位要清晰明確，是用于科研還是拿來生產(chǎn)和致病性有關(guān)的產(chǎn)品、還是用于飼養(yǎng)實驗動物以及做第三方檢測實驗室，我們的實驗室定位是第三方檢驗檢測實驗室，檢測一部分致病菌，所以定位也就是安全生物分級所對應(yīng)的BSL-2生物安全實驗室，主要用于檢測致病菌以及一些簡單的病毒學(xué)檢測。

　　個人理解的生物安全實驗室根據(jù)實驗對象的生物危害程度以及可采取的防護(hù)措施情況分成四級（方便記憶）：

　　1級—危害程度低，對健康成人及動植物不具有致病性，也就是說1級幾乎是無害的。

　　2級—危害程度中等，對健康成人及動物不會造成嚴(yán)重危害，可以被有效預(yù)防及治療。重點(diǎn)在于可以有效治療和有效預(yù)防。是可控的。

　　3級—危害程度高（標(biāo)準(zhǔn)寫高個體危害，低群體危害），對人及動物有高危害性，直接接觸或通過氣體傳播，具高度感染性，有預(yù)防和治療措施。也就是可預(yù)防及救治的，但效果就是個未知數(shù)了。

　　4級--危害程度很高（高個體危害，高群體危害），對人和動物及環(huán)境高度危險，氣溶膠傳播或傳播路徑不明，具有未知致病因子，沒有預(yù)防及治療措施。簡單的講就是無藥可解，當(dāng)然樂觀的講這種無藥可解也是相對的，4級危險級別當(dāng)我們的醫(yī)療手段發(fā)達(dá)到一定程度，也可降為3級安全級別，比如SARS病毒，目前已歸類到三級范圍，有預(yù)防和治療措施。

　　中華人民共和國衛(wèi)生部制定的《人間傳染的病原微生物名錄》就是根據(jù)危害程度及安全實驗室的安全級別來進(jìn)行歸類的。

　　二、BSL-2生物安全實驗室建設(shè)需要注意的關(guān)鍵設(shè)備。

　　通過是否經(jīng)過空氣傳播的生物因子實驗室分成a（不經(jīng)空氣傳播）b（經(jīng)空氣傳播）二類實驗室，b2類實驗室指不能通過有效利用安全隔離裝復(fù)制進(jìn)行操作的實驗室。

　　BSL-2生物安全實驗室指生物安全級別為2級的生物實驗室。

　　b2實驗室的具有2個關(guān)鍵設(shè)備：生物安全柜，高壓蒸汽滅菌器。

　　要建設(shè)好BSL-2級生物安全實驗室除了要把實驗室基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)好之外就需要把這2個關(guān)鍵設(shè)備落實好。

　　具體有以下幾點(diǎn)：

　　2.1生物安全柜及高壓蒸汽滅菌鍋的選購要求。

　　須購買具有生產(chǎn)資質(zhì)正規(guī)廠家的生物安全柜的，并且根據(jù)實驗室建設(shè)情況購置相匹配的生物安全柜。

　　因生物安全柜須與房間及周圍通風(fēng)系統(tǒng)密封連接，所以需要實驗室建設(shè)還未完成之前在購買完成并放置匹配布局位置。如果房子造好了再去整安全柜就不那么好改造了。由此引申的一些較大的設(shè)備，如二人或三人聯(lián)排的超凈臺，-80℃冰箱以及其他大型實驗設(shè)備需考慮門高門寬以及用電符合問題。

　　高壓蒸汽滅菌器，建議購買日本松下或廈門致微的滅菌鍋，這2款滅菌鍋的好處就是傻瓜式全自動，滅菌鍋密封性好，故障率低，且具有專用排氣筒，對周圍環(huán)境造成濕度影響較小，安全系數(shù)高等特點(diǎn)。如果對滅菌鍋使用有較高經(jīng)驗也可購買上海博迅50或70L滅菌鍋，也比較方便。不建議因節(jié)約費(fèi)用而購買手提式滅菌鍋，因具有體積小，升降溫膨脹快以及需要手動控制等缺點(diǎn)。

　　2.2生物安全柜校檢的具體要求。

　　由于校檢機(jī)構(gòu)及校檢人員的綜合素質(zhì)良莠不齊，所以在購置了生物安全柜之后，校檢需就校檢三個重要指標(biāo)和校檢機(jī)構(gòu)進(jìn)行確認(rèn)，這三個主要技術(shù)指標(biāo)就是：檢漏，風(fēng)速，潔凈度。

　　檢漏是生物安全柜特色的一個項目，是防止污染物回流到實驗室造成污染的的一個預(yù)防性檢查。

　　風(fēng)速，生物安全柜的原理是采用負(fù)壓雙層箱體結(jié)構(gòu)，風(fēng)機(jī)在頂部產(chǎn)生正壓，把一定風(fēng)速的的垂直風(fēng)（II級生物安全柜要求風(fēng)速達(dá)到0.5m/s）送到操作臺，進(jìn)氣流順著操作臺下面或側(cè)面的隔柵，向操作臺后面向上流動，與從后面隔柵流下的下沉氣流相遇?；旌希M(jìn)入回風(fēng)腔，然后在進(jìn)入風(fēng)機(jī)入口形成負(fù)壓。30%的氣流經(jīng)頂部高效過濾器過濾后排出，從而阻止污染物排出外界。剩下70%經(jīng)下沉氣流高效過濾后，再次形成潔凈循環(huán)風(fēng)（II級生物安全柜的循環(huán)風(fēng)和排風(fēng)比例為70%:30%），，避免柜內(nèi)產(chǎn)品或樣品收到污染。

　　潔凈度，II級生物安全柜要求潔凈度達(dá)到100級。

　　GB/T 16294-2010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌測試方法的附錄C附有技術(shù)要求半小時沉降菌不得超過1CFU/皿（萬級不超過3CFU/皿,10萬級不超過10CFU/皿）。圖片

　　2.3高壓蒸汽滅菌鍋校檢及使用要求。

　　目前就高壓蒸汽滅菌鍋要檢定和不檢定的爭論一直持續(xù)不斷，個人建議還是請專人來校檢為宜，畢竟壓力容器，馬虎不得，尤其有些操作員只會操作并不一定懂得結(jié)構(gòu)及安全須知的一些關(guān)鍵點(diǎn)。

　　高壓蒸汽滅菌鍋需要校檢的部分主要是溫度和壓力。溫度要校檢我們實驗滅菌所需的溫度點(diǎn)，比如121℃，以及滅糖化培養(yǎng)基的115℃，以及保溫用的100℃等，如果有單位使用134℃，也校檢一下；壓力方面，需聯(lián)系專門的壓力校檢機(jī)構(gòu)比如特種設(shè)備單位然后商議校檢壓力表的事宜。

　　2.4校檢報告的確認(rèn)。

　　經(jīng)相關(guān)機(jī)構(gòu)校檢之后并出具的報告，我們?nèi)〉脠蟾婧笮鑼πz報告進(jìn)行確認(rèn)，確認(rèn)不能流于形式，這是確認(rèn)我們的設(shè)備是否滿足我們使用要求的很重要的一步，首先確認(rèn)報告上面關(guān)于送檢單位信息、儀器型號、出廠編號等是否和我們的信息一致，再就是查看校檢單位所使用的標(biāo)準(zhǔn)是否適宜。

　　然后根據(jù)檢定規(guī)程、校檢技術(shù)規(guī)范來核查此項設(shè)備校檢結(jié)果是否滿足要求，還要根據(jù)我們所使用設(shè)備需要來評價是否滿足實驗需要。如有問題需要和生產(chǎn)商及校檢單位進(jìn)行溝通協(xié)商解決。

　　三、從事微生物檢驗檢測的實驗室建設(shè)需要注意的方方面面。

　　生物實驗室布局除了設(shè)計各檢測實驗室外，還要設(shè)計緩沖區(qū)域以及物流之中需要設(shè)計傳遞窗，并且具有紫外殺菌和單向聯(lián)動開啟功能（說白了就是放入開窗的時候里面的人不能同時可以開啟傳遞窗）。

　　設(shè)計以簡潔實用、流向清晰為主。不要設(shè)計成迷宮一般，人走進(jìn)去都搞不清楚哪兒是哪兒，那么風(fēng)流物流也就會亂糟糟的，這是教訓(xùn)。

　　生物實驗室建設(shè)時要充分考慮設(shè)備、流向、電力配置等因素，不然會造成房子造好了、拆門搬運(yùn)體積較大設(shè)備，或儀器運(yùn)行起來電力不夠等現(xiàn)象發(fā)生，或流向不清晰或有回路，造成交叉污染的可能性。

　　單向流問題，生物實驗室建設(shè)的重點(diǎn)是清潔區(qū)和污染區(qū)的分區(qū)要明顯，所以潔凈風(fēng)的流向以及人流、物流的走向很重要。

　　生物實驗室要求潔凈風(fēng)，需要安裝初、中、高空氣過濾裝置，風(fēng)向一般有上送下排或上送上排，進(jìn)風(fēng)口應(yīng)離地面2.5m以上，避開污染源。風(fēng)流從潔凈區(qū)到較低污染可能區(qū)再到較高污染可能區(qū)，要盡量減少風(fēng)的回流和渦流。排風(fēng)速度也要在一個范圍內(nèi)為宜，太高加速過濾器老化失效，太低帶不動室內(nèi)空氣的流動，并且要本著“排風(fēng)先于送風(fēng)開啟，后于送風(fēng)關(guān)閉”的原則。

　　生物實驗室用電，一般穿墻或用套管，盡量不走明線避免造成清潔死角，并且漏電保護(hù)裝置要備全及合適。實驗室用水，一般按照實驗單元設(shè)置閥門及止回閥，洗手等設(shè)施靠近實驗室出口處為宜。室必須配備洗眼及應(yīng)急淋浴裝置。防護(hù)區(qū)的污水處理裝置可采用化學(xué)消毒或高溫消毒滅菌方式。

　　生物實驗室建設(shè)過程中選材一般選擇不銹鋼、銅質(zhì)、無毒塑料等材質(zhì)，建議不要選擇木質(zhì)材料，以免霉菌污染。

　　生物實驗室門牌須有清晰表示，專用的生物危險符號（網(wǎng)上可購買粘貼），填寫負(fù)責(zé)人及緊急聯(lián)系電話等信息。

　　實驗室建設(shè)完成，驗收時候還需要注意的就是連接縫線，有許多實驗室從表面上看超凈間做的很漂亮，但仔細(xì)觀察，會發(fā)現(xiàn)連接線沒有拿膠粘好，或者排風(fēng)口釘子沒有上牢固，等等這些細(xì)節(jié)都是很重要的。