高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內(nèi),通過加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時由于蒸氣不能溢出,而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力,從而使沸點增高,得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。
如果操作不當,即達不到預(yù)期的滅菌效果。在操作高壓滅菌器有以下幾點注意事項
1、汽未放盡前,不得開啟高壓鍋;
2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時拿出,需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開,切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過夜。
3、壓力表指針在0.05MPa以上時,不能過快放汽,以防止壓力急速下降,液體滾沸,從培養(yǎng)容器中溢出。
4、操作過程,請注意安全,小心燙傷。
在一個標準大氣壓下水的沸點是100攝氏度,壓力越高,與之對應(yīng)壓力下的沸點越高,這里是高壓蒸汽鍋,說明壓力肯定大于一個標準大氣壓(通常情況下的地表面的大氣壓強就認為是一個標準大氣壓),也就是說高壓蒸汽鍋肯定要超過100攝氏度才能沸騰,才能產(chǎn)生蒸汽。至少要等到水煮沸,排出一分鐘左右的蒸汽后再把安全閥關(guān)閉,這樣可以使高壓蒸汽鍋里的壓力迅速上升,原來沸騰的水因為壓力的快速上升而停止沸騰,壓力大,沸點高,水蒸汽就變成液體水,而放出大量的汽化潛熱,就是高溫高壓的目的,從而達到殺菌的目的。在同一溫度下,濕熱的殺菌效力比干熱大,其原因有三:
一是濕熱中細菌菌體吸收水分,蛋白質(zhì)較易凝固,因蛋白質(zhì)含水量增加,所需凝固溫度降低;
二是濕熱的穿透力比干熱大;
三是濕熱的蒸汽有潛熱存在,每1克水在100℃時,由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時可放出2.26kJ(千焦)的熱量。這種潛熱,能迅速提高被滅菌物體的溫度,從而增加滅菌效力。
在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時,滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否干凈極為重要,因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓,所以,當水蒸汽中含有空氣時,在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。如果壓力未降到0時,打開排氣閥,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。要100度以上,也就是對應(yīng)壓力下的沸點后才能使水劇烈沸騰,將鍋內(nèi)空氣更多的排除。
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