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高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過(guò)加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。
如果操作不當(dāng)，即達(dá)不到預(yù)期的滅菌效果。在操作高壓滅菌器有以下幾點(diǎn)注意事項(xiàng)
1、汽未放盡前，不得開啟高壓鍋；
2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時(shí)拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開，切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過(guò)夜。
3、壓力表指針在0.05MPa以上時(shí)，不能過(guò)快放汽，以防止壓力急速下降，液體滾沸，從培養(yǎng)容器中溢出。
4、操作過(guò)程，請(qǐng)注意安全，小心燙傷。
在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下水的沸點(diǎn)是100攝氏度，壓力越高,與之對(duì)應(yīng)壓力下的沸點(diǎn)越高，這里是高壓蒸汽鍋,說(shuō)明壓力肯定大于一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓(通常情況下的地表面的大氣壓強(qiáng)就認(rèn)為是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓)，也就是說(shuō)高壓蒸汽鍋肯定要超過(guò)100攝氏度才能沸騰，才能產(chǎn)生蒸汽。至少要等到水煮沸，排出一分鐘左右的蒸汽后再把安全閥關(guān)閉，這樣可以使高壓蒸汽鍋里的壓力迅速上升，原來(lái)沸騰的水因?yàn)閴毫Φ目焖偕仙Ｖ狗序v，壓力大，沸點(diǎn)高，水蒸汽就變成液體水，而放出大量的汽化潛熱，就是高溫高壓的目的，從而達(dá)到殺菌的目的。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，其原因有三：
一是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低；
二是濕熱的穿透力比干熱大；
三是濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時(shí)，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出2.26kJ(千焦)的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而增加滅菌效力。
在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否干凈極為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。如果壓力未降到0時(shí)，打開排氣閥，就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。要100度以上，也就是對(duì)應(yīng)壓力下的沸點(diǎn)后才能使水劇烈沸騰，將鍋內(nèi)空氣更多的排除。
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