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          微孔板恒溫振蕩器在牛奶抗原抗體反應的應用

          來源:合肥艾本森科學儀器有限公司   2011年09月22日 23:15  

          溶液的配制

           

          1、稀釋抗體溶液:將抗體濃縮液搖勻,用緩沖液10倍稀釋抗體濃縮液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

           

          2、稀釋酶結(jié)合物:將酶結(jié)合物濃縮液搖勻,用緩沖液10倍稀釋酶結(jié)合物濃縮液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

           

          3、底物溶液的配制:用底物緩沖液10倍稀釋底物濃縮液,根據(jù)需要的量現(xiàn)用現(xiàn)配,底物溶液變藍禁止使用。

           

          七、樣品的前處理方法:

           

              牛奶:新鮮牛奶或解凍牛奶50&micro;L,加水950&micro;L,1:20稀釋,作樣品液備用。

           

          八、檢測步驟:

           

          1、剪開錫箔袋,按每個標準液和樣品提取液2孔計算所需微孔板條的數(shù)量,插入框架。

           

          2、各取系列標準液和樣品液20&micro;L分別加到其對應微孔中,每個標準和樣品加雙孔。

           

          3、每孔加稀釋好的酶結(jié)合物20&micro;L。

           

          4、每孔加稀釋好的抗體100&micro;L,在MicBio-IV微孔板恒溫振蕩器上*混勻,用封口膜封好,室溫孵育30分鐘。

           

          5、倒出孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍打,使孔中沒有殘留的液體。使用多道移液器,每孔加水250&micro;L,再傾倒干凈。如此洗板,重復三次。

           

          6、每孔加底物溶液100&micro;L,室溫避光孵育30分鐘。

           

          7 、每孔加終止液100&micro;L,混勻。

           

          8 、在450nm波長處測吸光度值。60分鐘內(nèi)讀數(shù)。

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