流式細(xì)胞儀可以檢測(cè)哪些項(xiàng)目?
原理:將待測(cè)細(xì)胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中,在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動(dòng)室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出,形成細(xì)胞柱。流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過(guò)聚焦整形后的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下,產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號(hào)同時(shí)被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測(cè),這種信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大??;熒光信號(hào)的接受方向與激光束垂直,經(jīng)過(guò)一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個(gè)不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。
流式細(xì)胞儀檢測(cè)哪些項(xiàng)目:
1、流式細(xì)胞儀可以檢測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu),包括:細(xì)胞大小、細(xì)胞粒度、細(xì)胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細(xì)胞周期、RNA含量、蛋白質(zhì)含量。
2、流式細(xì)胞儀可以檢測(cè)細(xì)胞功能,包括:細(xì)胞表面/ 胞漿/核的特異性抗原、細(xì)胞活性、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子、酶活性、激素結(jié)合位點(diǎn)和細(xì)胞受體。
3、流式可以檢測(cè)的樣本很多:
①細(xì)胞表面的蛋白,通過(guò)熒光抗體直接標(biāo)記。
②細(xì)胞內(nèi)部的蛋白,細(xì)胞固定,通透后再用熒光抗體識(shí)別。
③細(xì)胞內(nèi)部的DNA含量,細(xì)胞固定,通透后加DNA染料。
④細(xì)胞內(nèi)部鈣離子濃度,直接加鈣離子濃度熒光染料染色。
⑤細(xì)胞內(nèi)部線粒體膜電位,比如JC-1,羅丹明染料。
⑥使用微球陣列,可以同時(shí)檢測(cè)溶液中數(shù)十種可溶性蛋白的濃度。
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