蛋白質(zhì)是人體細(xì)胞中必要的組成部分,因此人類對(duì)于食物中蛋白質(zhì)的攝取是非常重要的,關(guān)系到人類的生命活動(dòng)。那么換句話來說,測(cè)定食物中蛋白質(zhì)的含量,也是尤為必要的一件事情,隨著儀器產(chǎn)品的發(fā)展,現(xiàn)在我們?cè)谶M(jìn)行蛋白質(zhì)測(cè)定的時(shí)候都是采用專業(yè)的凱氏定氮儀。經(jīng)過多次的試驗(yàn)表明,凱氏定氮儀能夠避開手工方法的缺點(diǎn),其測(cè)定結(jié)果符合國際標(biāo)準(zhǔn),而且測(cè)量速度快、穩(wěn)定,因此是值得推薦的檢測(cè)蛋白質(zhì)含量的設(shè)備。
但還需要注意的是蛋白檢測(cè)的前處理消化步驟也很關(guān)鍵,這就需要用到智能消化爐,所以為了保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,在使用定氮儀測(cè)定蛋白質(zhì)含量的時(shí)候,有以下幾個(gè)方面需要注意:
1.消化時(shí)間要掌握好,時(shí)間過長會(huì)引起氨的損失;消化時(shí)間不夠,消化不完全也會(huì)導(dǎo)致總氮量偏低。一般保險(xiǎn)起見,從文火開始消化到420℃保溫,需要2h左右的時(shí)間。
2.樣品放入消化管內(nèi)時(shí),不要沾附頸上,若沾附時(shí)可用少量水沖下,以免被檢樣消化不完全,結(jié)果偏低。
3.硫酸鉀與硫酸用量的比值是消化成功的關(guān)鍵,它決定酸的沸點(diǎn),也決定消化所需的時(shí)間。添加硫酸鉀可以提高溫度加快有機(jī)物分解,但硫酸鉀量過大,沸點(diǎn)太高,生成的硫酸氫銨就分解放出氨,使氮損失。因此當(dāng)硫酸過多的被消耗或樣品中脂肪含量過高時(shí),要增加硫酸的量。
4.消化時(shí),若樣品含糖高或含脂較多時(shí),注意控制加熱溫度,可加入少量正辛醇或液體石蠟,或消泡劑減少泡沫產(chǎn)生。
5.消化時(shí)若樣品不易消化至澄清透明,可將消化管中溶液冷卻,加入數(shù)滴過氧化氫后,再繼續(xù)加熱消化至完全。
6.定氮儀使用前可先空蒸一段時(shí)間,以除去管道內(nèi)可能殘留的氨,減少誤差。
7.消化時(shí)熱源的強(qiáng)度同迅速消化和完全氨化關(guān)系很大,在整個(gè)消化過程中,不要直接用強(qiáng)火,保持和緩的沸騰,以文火慢慢升溫,以免附在壁上的蛋白質(zhì)在無硫酸存在的情況下,使氮有損失。
8.將消化后的樣品管放入蒸餾室時(shí),為避免蒸餾過程中溶液沸騰時(shí)溢出造成氨損失,在將消化管至密封圈時(shí)用手輕旋一下消化管,使與密封圈接觸更加密閉。
9.定氮儀加堿管路使用前要用氫氧化鈉溶液沖洗,使用后要及時(shí)用蒸餾水反復(fù)沖洗,不能長期積有堿液,以免放置后管路堵塞。
對(duì)于還是使用凱氏定氮儀的企業(yè)而言,以上的注意事項(xiàng)還是很有參考價(jià)值的。
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