一、激光共焦顯微鏡是一種用于材料科學領域的分析儀器,可實現(xiàn)最多500幅圖像自動拼圖,水平分辨率12μm,z軸分辨率0.01μm。測量亞微米級的線寬、線與面的粗糙度,透明膜厚等數(shù)據(jù),原位觀察和獲取材料表面形貌,三維輪廓。
二、發(fā)展背景:
(1)在傳統(tǒng)光學顯微鏡基礎上,激光掃描共聚焦顯微鏡用激光作為光源,采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察的對象進行數(shù)字圖像處理觀察、分析和輸出。其特點是可以對樣品進行斷層掃描和成像,進行無損傷觀察和分析細胞的三維空間結構。
(2)同時,利用免疫熒光標記和離子熒光標記探針,該技術不僅可觀察固定的細胞、組織切片,還可以對活細胞的結構、分子、離子及生命活動進行實時動態(tài)觀察和檢測,在亞細胞水平上觀察諸如Ca2+,pH值,膜電位等生理信號及細胞形態(tài)的變化,成為形態(tài)學、分子細胞生物學、神經(jīng)科學、藥理學、遺傳學等領域中新一代強有力的研究工具,極大地豐富了人們對細胞生命現(xiàn)象的認識。
三、原理:組織樣品中如果有可被激發(fā)的熒光物質,受到激發(fā)后發(fā)出的熒光經(jīng)原來入射光路直接反向回到分光鏡,通過探測針孔時先聚焦,聚焦后的光被光電倍增管(PMT)探測收集,并將信號輸送到計算機,處理后在計算機顯示器上顯示圖像。
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