糖類(lèi)色譜柱的基本原理及使用注意事項(xiàng)
色譜柱是HPLC分離過(guò)程的核心,對(duì)于糖類(lèi)的分析來(lái)說(shuō),不同的色譜柱直接決定分離的對(duì)象、過(guò)程和效果。糖類(lèi)色譜柱的基本分離原理是體積排阻色譜,除此之外,還有分配色譜的原理和離子相互作用,比如配位交換,樣品與抗衡離子互相作用,使得在精細(xì)結(jié)構(gòu)上不同的各種單糖得以分離。
糖類(lèi)色譜柱的特點(diǎn):
1、對(duì)糖和有機(jī)酸同時(shí)分析色譜柱。
2、中性糖用尺寸排阻法分離,有機(jī)酸用離子排阻法分離。
3、適用于糖醛酸和醛糖酸的分析。
使用注意事項(xiàng):
1、一般情況下緩沖液濃度為0.005~0.02mol/L即可。
2、流動(dòng)相在使用前一定要通過(guò)0.5μm以下的濾膜過(guò)濾。
3、不推薦使用甲醇作為流動(dòng)相。
4、如果柱子使用過(guò)緩沖液或酸后,就不能再使用乙腈/水為流動(dòng)相。因此使用緩沖液或酸后,建議今后一直將此柱作為緩沖液專(zhuān)用柱,不建議使用此柱再做其他分析。
5、在pH中性附近使用時(shí)保留會(huì)增強(qiáng)。
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