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          國際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源發(fā)展現(xiàn)狀

          來源:北京萊艾特科技發(fā)展有限公司   2023年11月13日 13:32  

          美國是生命科學(xué)技術(shù)發(fā)達(dá)的國家,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源在其中發(fā)揮了重要的支撐作用。近50年來,美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)通過其下屬的美國國家研究資源中心(NCRR)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源、設(shè)施等進(jìn)行了大規(guī)模的建設(shè),形成了齊全的從昆蟲、水生生物、嚙齒類到非人靈長(zhǎng)類等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源體系。在美國有1300個(gè)有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作的生產(chǎn)與研究單位。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作已形成為一個(gè)專業(yè)化、規(guī)格化、商品化和社會(huì)化的科研和經(jīng)濟(jì)體系。

          NCRR是NIH下屬的一個(gè)非營利機(jī)構(gòu),以項(xiàng)目資助的方式管理美國研究資源。美國NIH和其名下的比較醫(yī)學(xué)部或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物中心多沒有隸屬關(guān)系,只是要從NIH獲取資助就要服從NIH的管理。NCRR有個(gè)比較醫(yī)學(xué)部(DCM),負(fù)責(zé)資助個(gè)人或研究機(jī)構(gòu)以促進(jìn)這些資源單位為生物醫(yī)學(xué)研究提供高質(zhì)量、無疾病的健康動(dòng)物或特殊動(dòng)物。NCRR經(jīng)過50年的發(fā)展,資助開發(fā)了200種26000個(gè)品系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源,包括:嚙齒類動(dòng)物、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物、脊椎動(dòng)物、魚類動(dòng)物、生物材料及相關(guān)生物信息等。2011年,由于美國經(jīng)濟(jì)不景氣,NCRR光榮地完成歷史使命,被國家轉(zhuǎn)化科學(xué)促進(jìn)中心(NCATS)替代。

          相對(duì)于歐洲而言,美國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用情況并不透明。有人估計(jì)美國每年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量在2000萬只以上。美國《動(dòng)物福利法》和《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利法》要求美國農(nóng)業(yè)部定期檢查實(shí)驗(yàn)用貓、狗和非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物的使用情況(不包括嚙齒類動(dòng)物、魚類和鳥類)。美國動(dòng)物福利組織(PETA)在2014年的調(diào)查發(fā)現(xiàn)NIH資助的25個(gè)主要機(jī)構(gòu),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用量在過去15年間增加了73%,這主要是小鼠、大鼠的使用量。

          (1)嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源

          嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物包括小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、倉鼠等,是常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,占總數(shù)的90%以上。嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生命科學(xué)和醫(yī)藥研究中發(fā)揮核心作用,可以轉(zhuǎn)化為人類疾病的治療方法。特別是小鼠,與人類遺傳基因上許多共同之處,常用于開發(fā)、生理、行為、疾病和基因工程技術(shù)等方面研究?;趪X類動(dòng)物模型,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了許多重要的生物醫(yī)學(xué)成果,推動(dòng)了人類健康發(fā)展。下表列舉了美國嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心(表1)。

          1 美國嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心一覽表

          資源單位

          承擔(dān)機(jī)構(gòu)

          資源種類

          突變小鼠資源中心(Mutant Mouse Regional Resource Centers)

          包括杰克遜實(shí)驗(yàn)室、密蘇里大學(xué)、加利福尼亞大學(xué)、北卡羅來納大學(xué)等。是一個(gè)信息庫,多個(gè)不同國家的中心的整合信息

          32776個(gè)小鼠品系,包括活體小鼠3856個(gè),ES細(xì)胞系28920個(gè)

          誘發(fā)突變小鼠資源(Induced Mutant Resource)

          杰克遜實(shí)驗(yàn)

          304種化學(xué)誘變小鼠品系

          國家無菌嚙齒類動(dòng)物資源中心(National Gnotobiotic Rodent Resource Center)

          北卡羅來納大學(xué)

          無菌、悉生、SPF小鼠、大鼠、斑馬魚等20 多種。小鼠品系包括129S6/SvEv、BALB/C、C57BL/6J、Swiss、CD和部分轉(zhuǎn)基因動(dòng)物

          鹿鼠遺傳資源中心(Peromyscus Genetic Stock Center

          南卡羅萊納大學(xué)

          10種野生型鹿鼠和20 種突變型鹿鼠。用于生態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)、生物進(jìn)化、疾病和行為學(xué)研究

          特殊小鼠品系資源(Special Mouse Strains Resource)

          杰克遜實(shí)驗(yàn)室

          249個(gè)特殊品系,包括重組近交系(199)和染色體置換系(50)

          大鼠資源研究中心(Rat Resource and Research Center

          包括密蘇里大學(xué)、密歇根大學(xué)和德克薩斯大學(xué)等

          300多種大鼠品系

          Cre條件敲除品系資源

          杰克遜實(shí)驗(yàn)室

          Cre品系,Cre reporter品系,loxPflanked(floxed)品系

          (2)非人靈長(zhǎng)類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源

          非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物是生物醫(yī)學(xué)研究中常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。美國NIH 資助開發(fā)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物(NHP)人類疾病模型,提供基礎(chǔ)設(shè)施和專業(yè)知識(shí),并促進(jìn)NHP在生物醫(yī)學(xué)研究各個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用以及提高動(dòng)物福利等。美國有8個(gè)非人靈長(zhǎng)類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,還有若干實(shí)驗(yàn)基地(表2),其NHP資源。

          2 美國非人靈長(zhǎng)類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心一覽表

          資源單位

          承擔(dān)機(jī)構(gòu)

          資源種類

          研究領(lǐng)域

          加利福尼亞國家靈長(zhǎng)類研究中心(California National Primate Research Center

          加利福尼亞大學(xué)

          5300只恒河猴和56只南美伶猴

          傳染病、生殖和發(fā)育、神經(jīng)疾病、肺疾病、、認(rèn)知行為等

          新英格蘭國家靈長(zhǎng)類研究中心(New England National Primate Research Center,注:已關(guān)閉)

          哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院

          9種1700多只猴,包括1000多只恒河猴,其他舊大陸猴,及新大陸猴,包括狨猴、松鼠猴、絹毛猴

          艾滋病、癌癥、藥物成癮、精神疾病、神經(jīng)退行性疾病等

          俄勒岡國家靈長(zhǎng)類研究中心(Oregon National Primate Research Center

          俄勒岡州大學(xué)

          3800只恒河猴,335只日本雪猴,10只長(zhǎng)尾黑顎猴,9只狒狒和85只食蟹猴

          生殖和發(fā)育學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、病理學(xué)和免疫學(xué)、代謝性疾病、干細(xì)胞治療、衰老等研究

          西南國家靈長(zhǎng)類研究中心(Southwest National Primate Research Center)

          西南大學(xué)

          3200只猴,包括1600只狒狒,其他為SPF恒河猴、狨猴和絹毛猴。還有160只黑猩猩

          慢性疾病、傳染病和生物防御、發(fā)育和老化等

          圖蘭國家靈長(zhǎng)類研究中心(Tulane National Primate Research Center

          圖靈大學(xué)

          5000只猴,包括恒河猴、食蟹猴、狒狒(5種)、綠猴、松鼠猴、白眉猴(5種)、赤猴、豚尾猴

          傳染病和再生醫(yī)學(xué)研究,包括艾滋病、萊姆病、結(jié)核病和生物防御相關(guān)產(chǎn)品

          華盛頓國家靈長(zhǎng)類研究中心(Washington National Primate Research Center)

          華盛頓大學(xué)

          3000只猴,包括食蟹猴、恒河猴、松鼠猴、豚尾猴

          艾滋病相關(guān)疾病、系統(tǒng)生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、生殖和發(fā)育學(xué)、新發(fā)傳染病等

          威斯康辛國家靈長(zhǎng)類研究中心(Wisconsin National Primate Research Center

          威斯康辛大學(xué)

          3000只猴,包括恒河猴、食蟹猴和狨猴

          全球傳染病(GID)、再生和生殖醫(yī)學(xué)(RRM)、能量代謝和慢性疾?。‥MCD)、神經(jīng)科學(xué)

          耶基斯國家靈長(zhǎng)類研究中心(Yerkes National Primate Research Center)

          耶基斯大學(xué)

          3400只猴,包括恒河猴、白眉猴、松鼠猴、食蟹

          猴,還有黑猩猩

          微生物和免疫學(xué)、神經(jīng)行為學(xué)和精神疾病、發(fā)育和認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)、神經(jīng)藥理學(xué)和神經(jīng)疾病

          加勒比靈長(zhǎng)類動(dòng)物研究中心(CPRC

          波多黎各大學(xué)醫(yī)學(xué)院

          SPF猴

          社會(huì)和性行為,群體遺傳學(xué)、生殖生物學(xué)、藥理學(xué)、功能形態(tài)和自發(fā)疾病和恒河猴寄生蟲

          狒狒研究資源(Baboon Research Resources)

          俄克拉荷馬大學(xué)健康科學(xué)中心

          不同年齡段的狒狒及SPF狒狒

          狒狒相關(guān)生物醫(yī)學(xué)、行為學(xué)研究,疾病動(dòng)物模型

          松鼠猴繁殖和研究資源(Squirrel Monkey Breeding and Research Resource

          安德森癌癥中心熱帶靈長(zhǎng)類中心

          450 個(gè)不同年齡段的松鼠猴

          行為研究、生殖內(nèi)分泌學(xué)、醫(yī)學(xué)靈長(zhǎng)類動(dòng)物學(xué)、遺傳學(xué)

          長(zhǎng)尾黑顎猴研究中心(Vervet Research Colony)

          維克森林大學(xué)醫(yī)學(xué)院

          每年提供100只長(zhǎng)尾黑顎猴,包括SPF猴

          代謝性疾病、理學(xué)、生殖生物學(xué)研究

          (3)其他脊椎和無脊椎動(dòng)物資源

          包括酵母、果蠅、線蟲、四膜蟲、海兔、豬、蟾蜍等資源(表3),以及使用這些動(dòng)物開發(fā)的動(dòng)物模型、基因工程動(dòng)物、干細(xì)胞、細(xì)胞系或遺傳資源、計(jì)算機(jī)建模等。

          3 美國無脊椎實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心一覽表

          資源單位

          承擔(dān)機(jī)構(gòu)

          資源種類

          果蠅資源中心(Bloomington Drosophila Stock Center)

          印第安納大學(xué)

          果蠅41000個(gè)品系

          果蠅基因組學(xué)資源中心(DGRC)

          印第安納大學(xué)

          100萬以上的細(xì)胞克隆

          線蟲遺傳資源中心(Caenorhabditis Genetics CenterCGC)

          明尼蘇達(dá)大學(xué)、愛因斯坦醫(yī)學(xué)院

          線蟲11273

          國家海兔資源中心(National Resource for Aplysia)

          邁阿密大學(xué)

          海兔10000多個(gè)

          國家嗜熱四膜蟲資源中心(National Resource for Cephalopods)

          康奈爾大學(xué)

          多種嗜熱四膜蟲

          國家豬資源研究中心(National Swine Resource & Research Center)

          密蘇里大學(xué)

          杜洛克、長(zhǎng)白豬等10個(gè)品系和16個(gè)轉(zhuǎn)基因品系。

          國家蟾蜍資源中心(National Xenopus Resource Center

          海洋生物研究所

          25個(gè)非洲爪蟾品系,提供近交系、突變系和轉(zhuǎn)基因爪蟾。

          (4)水生實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源

          包括斑馬魚、其他魚類、海洋鼻涕蟲等水生動(dòng)物、疾病模型和相關(guān)生物材料。水生實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生殖周期短,卵透明,常用于發(fā)育生物學(xué)、行為學(xué)、人類疾病和功能基因組學(xué)研究。俄勒岡州大學(xué)斑馬魚國際資源中心擁有斑馬魚13161個(gè)品系。德克薩斯州大學(xué)的劍尾魚遺傳資源中心擁有劍尾魚23種,65個(gè)品系。

          (5)其他資源

          美國其他生物材料資源中心,包括基因分析資源、信息資源、獸醫(yī)資源與試劑、生物材料資源等。德州農(nóng)工大學(xué)醫(yī)藥學(xué)院健康科學(xué)中心再生醫(yī)學(xué)研究所擁有數(shù)千種成人間充質(zhì)干細(xì)胞資源。美國疾病研究交換所(NDRI)擁有人體組織和器官資源,每年提供4000多份樣本給癌癥、傳染病、心臟病、毒理和等研究機(jī)構(gòu)。德州農(nóng)工大學(xué)Kingsville 自然毒素研究中心構(gòu)建了毒蛇資源中心,擁有29種450多條毒蛇,提供蛇的毒液、腺體、皮膚、血液和器官用于毒物研究。


          美國的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源在美國國內(nèi)實(shí)現(xiàn)了很高程度的共享,同時(shí)也輻射到了歐洲。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源研究一直是發(fā)達(dá)國家的關(guān)注的重點(diǎn)之一,不僅有研制、培育途徑,還有購買、引進(jìn)或掠奪等多種途徑;不僅作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源,也作為物種資源加以保存、培育和利用;對(duì)生命科學(xué)、醫(yī)藥等起到了極大的支持作用。而歐洲采用多國合作、集中研制的形式,也在基因工程動(dòng)物資源方面占領(lǐng)了一席之地。以英國劍橋大學(xué)Sanger研究所牽頭,德國和美國參與,總投入2億英鎊左右,建立了新一代的基因工程修飾小鼠胚胎干細(xì)胞資源庫。采用集中大規(guī)模研制模式,目前劍橋大學(xué)Sanger研究所已經(jīng)有近20000種新一代基因敲除小鼠胚胎干細(xì)胞庫。其大規(guī)模、高效率的研究模式,具中國效仿價(jià)值。

          國外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制級(jí)別越來越高,規(guī)模化生產(chǎn)便于實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量控制。近交系、SPF級(jí)、基因工程動(dòng)物等數(shù)量逐漸增加,普通動(dòng)物越來越少。由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和供應(yīng)方面產(chǎn)業(yè)化程度較高,為了保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量,在競(jìng)爭(zhēng)激烈的市場(chǎng)上處于有利位置,各個(gè)企業(yè)都制訂有自己的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。比如大的實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠商品化生產(chǎn)、銷售公司——Charles River制定的標(biāo)準(zhǔn)在全球?qū)嶒?yàn)動(dòng)物領(lǐng)域內(nèi)得到基本認(rèn)同,具有一定的代表性。以英國劍橋大學(xué)桑格研究所牽頭,德國和美國參與,總投入兩億英鎊左右,建立了新一代的基因工程修飾小鼠胚胎干細(xì)胞資源庫,在未來幾年內(nèi)將完成兩萬以上基因敲除。

          其中,英國是目前世界上實(shí)驗(yàn)動(dòng)物統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)最準(zhǔn)確的國家之一。1940年只有約100萬只動(dòng)物用于科學(xué)研究,但1960年的數(shù)量增加到350萬只,1971年達(dá)到560萬只,幾年后仍然保持在550萬只左右。自1980年以來,這一數(shù)字顯著下降,2001年降至262萬,不到1970年使用量的一半。近年來,英國的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量有所增加,在2012年增加到411萬,比2001年增加了57%。越來越多的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用量帶給時(shí)任英國首相大衛(wèi)卡梅倫聯(lián)合政府很大的壓力(2010-2016)。

          根據(jù)用于科學(xué)研究的動(dòng)物物種紀(jì)錄,超過70%的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是嚙齒動(dòng)物。2000年,英國五大廣泛使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是小鼠、大鼠、魚類、鳥類和豚鼠,分別占總數(shù)的59.2%、19.7%、9.0%、4.6%和2.6%。2001年,嚙齒動(dòng)物占英國研究動(dòng)物的82%;魚、兩棲動(dòng)物、爬行動(dòng)物和鳥類占14%;小型哺乳動(dòng)物(嚙齒動(dòng)物除外)占2.3%;大型哺乳動(dòng)物占1.3%;狗貓占0.4%;和非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物占0.1%。2014年,常用的動(dòng)物是小鼠、魚類、大鼠、鳥類、其他動(dòng)物和受特別保護(hù)的動(dòng)物,分別占總數(shù)的60%、14%、12%、7%、6%和1%。

          由2016年英國使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物種統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)(Annual Statistics of Scientific Procedures on Living Animals Great Britain,2016)顯示,英國共使用了393.6萬只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(表1.3-1)。其中,使用最多的為小鼠約72.8%(286.6萬只),其次為魚類約13.6%(53.5萬只),之后依序?yàn)榇笫蠹s6.3%(24.9萬只)、鳥類約3.8%(15.1萬只)、其它約3%(13.3萬只),另外受特別保護(hù)的物種(specially protected species)的使用,主要是馬(8900個(gè)計(jì)劃)、狗(4,900個(gè)計(jì)劃)、非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物(3600個(gè)計(jì)劃)和貓(190個(gè)計(jì)劃)。比較2016年和2015年的物種,在使用數(shù)量上有顯著變化,除了豚鼠(guinea pigs)增加20%(4400只)至26000只(與2014年數(shù)量相當(dāng)),家禽增加9%(12000只)至138000只,兔子增加9%(1300只)至15000只,綿羊增加3%(1300只)至48000只外;其它動(dòng)物如大鼠,則減少7%(19000只)至239000只,與2014年的數(shù)字相當(dāng),小鼠則減少4%(49000只)至122萬只;在魚類總體減少2%(7000只)至287000只,其中斑馬魚使用的數(shù)量增加了28%(42000只),“其他魚類”的使用則減少了34%(49000只)。

          值得注意的是,從2007年至2016年在英國前三大使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(小鼠、大鼠及魚類)使用數(shù)量變化,顯示英國在3Rs觀念的倡導(dǎo)下,此三種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用數(shù)量確實(shí)有逐年減少的趨勢(shì)(圖 1)

          圖1 2007年至2016年英國使用小鼠、大鼠和魚類作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量的變化

          資料來源:Annual Statistics of Scientific Procedures on Living Animals Great Britain,2016


          另外,分析實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)其遺傳的狀態(tài)為基因改變動(dòng)物(genetically altered animals)或非基因改變動(dòng)物(not genetically altered animals)的比例,顯示2016年在英國約有729000個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物涉及改變基因,此數(shù)量比2015年增加1%(9600只),持續(xù)過去9年的增長(zhǎng)趨勢(shì)。且較2007年以來使用改變基因動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)研究的數(shù)目增加了36%(194,000只)。相反的,沒有涉及遺傳改變的動(dòng)物的數(shù)量自2015年至2016年期間下降了5%至129萬只,繼續(xù)呈下降趨勢(shì),若從2008年高峰的165萬只計(jì)算則大約減少21.8%(圖2)。

          圖 2  2007年至2016年,英國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),其遺傳的狀態(tài)(基因改變過或未經(jīng)過基因改變)

          資料來源:Annual Statistics of Scientific Procedures on Living Animals Great Britain,2016




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