Biotium-核酸染料-eb替代染料是由Biotium公司研發(fā)的GelRed和GelGreen 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩(wěn)定于一身的熒光核酸染色試劑。其水溶染色劑,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環(huán)境污染。
高靈敏度GelRed和GelGreen是目前市場中靈敏的凝膠核酸染料穩(wěn)定性可以使用微波爐加熱,染料和預(yù)制凝膠可以在室溫下長期保存。
GelRed更安全,艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果表明,該染料的誘變性遠(yuǎn)小于溴化乙錠 ( EB ) 和SYBR 系列染料;GelRed適應(yīng)性更為廣泛,適用于預(yù)制凝膠法和凝膠電泳后染色法 ;GelRed染色更簡單,與 EB 一樣,在預(yù)制膠和電泳過程中不必?fù)?dān)心染料降解;而電泳后染色過程也只需 30 分鐘且無需脫色或沖洗。
由Biotium公司研發(fā)的GelRed和GelGreen 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩(wěn)定于一身的熒光核酸染色試劑。其水溶染色劑,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環(huán)境污染。
目前大多數(shù)商業(yè)化的核酸染料(凝膠染色試劑)總是在安全性、穩(wěn)定性和靈敏性等方面令人滿意。例如,雖然 EB(溴化乙啶)作為目前使用廣泛的核酸凝膠染色試劑,能夠在多數(shù)應(yīng)用中提供可以接受的靈敏度,但它是一種高誘變性的化學(xué)物質(zhì),對人體潛在危害較大。而且EB染色后會產(chǎn)生較高的背景熒光信號。SYBR Green I 和 SYBR Gold 也是靈敏度較高的凝膠染色試劑。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微堿性電泳緩沖溶液或預(yù)制凝膠中會快速降解,穩(wěn)定性差導(dǎo)致染色效果不可靠。 SYBR safe 被認(rèn)為是較為安全的核酸染料 ,但它的染色效果還遠(yuǎn)不及 SYBR Green I 。
常用的染色方法有預(yù)制凝膠染色(前染)和凝膠電泳后染色(后染),無論采用哪一種方法,GelRed 和 GelGreen,都能表現(xiàn)出較高的靈敏度。
為配合302/312 nm UV 凝膠成像系統(tǒng)而設(shè)計(jì)的 GelRed ,按照Biotium公司創(chuàng)新的試驗(yàn)步驟(該試驗(yàn)步驟中使用稀釋的 NaCl 溶液替代傳統(tǒng)的 TBE 緩沖溶液),在凝膠電泳后染色法中優(yōu)于或者至少相當(dāng)于 SYBR Gold 。但與 SYBR Gold 不同, GelRed 在預(yù)制凝膠法中使用時(shí)仍然有較高的靈敏度,事實(shí)上GelRed 在檢測低濃度、微量 DNA 方面比 EB 表現(xiàn)出更高的靈敏度,尤其對小分子量的 DNA 檢測較為靈敏。
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